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CRISPR(clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒DNA 或其他外源DNA 的免疫机制。在该机制中,Cas 蛋白(CRISP-associated protein)含有两个核酸酶结构域,可以分别切割两条DNA 链。一旦与crRNA(CRISPR RNA)和tracrRNA 结合形成复合物,Cas 蛋白中的核酸酶即可对与复合物结合的DNA 进行切割。切割后DNA 双链断裂从而使入侵的外源DNA 降解。
1)课题设计,合成引物
2)CRISPR/Cas9质粒构建
3)sgRNA 活性检测
4)打靶载体构建
5)CRISPR/Cas9体外转录制备mRNA
Crispr/Cas技术途径及原理
CRISPR/Cas9技术特点
1、可实现对靶基因多个位点或多个基因同时敲除;
2、实验周期短,价格低;
3、可应用于大小鼠等,无物种限制。
CRISPR/Cas9技术特点1、可实现对靶基因多个位点或多个基因同时敲除;2、实验周期短,价格低;3、可应用于大小鼠等,无物种限制。
CRISPR/Cas9基因敲除-基因敲除技术,CRISPR/Cas9基因敲除
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