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Biolistic PDS-1000/He 基因枪系统将微米大小的、包被有核酸的金或鸽微粒(0.6-1.6 μm )加速到所需要的速度, 从而将基因导入细胞、组织或器官。系统利用高压氨气的轰击,来推动携带有微粒的塑料大颗粒载体盘朝目标细胞方向加速。推进大颗粒载体的氨气压力由所使用的不同破裂盘决定。破裂盘是一种可在特定压力下破裂的塑料密封体。终止屏可阻止大颗粒载体,但微粒可以通过从而进入靶细胞。为了提高这一进程的效率,可抽空转化室, 使压力低于大气压力,从而当微粒进入靶细胞时可减少其摩擦阻力。
1、一种可重复的、转化完整培养细胞的方法,几乎无需对细胞进行处理
2、可以避免使用传统转染方法时化学试剂对靶细胞的毒性作用
3、实验过程的最大控制
4、高重复性
PDS-1000/He 基因枪系统加上 Hepta 适配器后,可以比标准系统多转化 7-10 倍的细胞。它配接 PDS-1 000/He 系统的冲击室,将氯气冲击波分导至 7 个载体盘处。这样,通过在更大面积上均一地分散 DNA 包被的金粉或鸽粉,增加了这个系统一次轰击的细胞数。当氨气被分成 7 道时,降低了压力和颗粒速度,该系统特别适合不太需要强大穿透力的植物和培养细胞。
轰击参数 *
细胞类型
真空 ("Hg)
目标间距 (cm)
氯气压力 (psi)
金属微粒大小
细菌
29
6
1,100
M-5 鸽粉
酵母菌
28
1,300
0.6 μm 金粉
藻类
植物
胚芽
1.0 μm 金粉
愈伤组织
9
细胞器
动物
组织培养
15
3
1.6 μm 金粉
组织切片
25
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