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噬菌体展示技术(Phage Display)是一种基因表达产物和亲和选择相结合的技术,以改造的噬菌体为载体,把待选基因段定向插入噬菌体外壳蛋白质基因区,使外源蛋白表达展示噬菌体表面,进而通过亲和富集法筛选binder。 噬菌体展示技术作为一种新兴的研究方法和工具,在蛋白质机构等诸多研究上已经广泛应用。1、高通量的淘选(Panning);2、科用于模拟表达的筛选(Screening);3、易于纯化和表达; 纳米抗体文库构建。制备步骤如下:1、采取免疫或未免疫的羊驼外周血液。2、提取总RNA,反转录成CDNA,3、利用巢式PCR扩增VHH,克隆至噬菌粒载体。4、将重组载体转化至宿主细胞中,构建天然或免疫的羊驼源噬菌体展示纳米抗体文库。
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