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基于独家专利 IOS(Integration Operating System) 重组技术,吉锐生物可将目的基因定点整合到基因组的经过筛选的高表达活性位点中,这些位点不仅安全而且基因表达量高,可以实现目的基因过表达,并能长期稳定遗传。实验周期短(3-6 周),整合效率高。对于不同长度的基因的整合,能达到一致整合效率,并可同时整合多个基因。
❀IOS原理
❀基因超高表达细胞株构建(GS163)
❀实验流程
❀实验案例
1. 设计针对2个位点的特异性Oligo; 2. 电转定点整合载体(包含RFP基因)、Oligo和RP蛋白至CHO-K1细胞中; 3. Puromycin/G418药杀细胞池,获得稳转细胞池; 4. 单克隆生长及Q-PCR验证(图1); 5. 获得RFP蛋白稳定表达的CHO-K1纯克隆(图2);
图1为. Q-PCR检测不同克隆目的基因的表达情况(zei高可达到300倍!)
图2为. 荧光显微镜观察RFP基因表达情况。
IOS基因过表达/超高表达稳转细胞株构建,
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