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实时荧光定量 PCR (real-time PCR) 技术是在 PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程,zei后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。用于候选基因或候选的 microRNA 表达水平的定量分析。RNA 提取、反转录 cDNA 第一链、引物设计与合成可由本平台完成,也可由测试方完成并提供高质量的 cDNA 和扩增引物。
❀服务内容
1. 抽提样品 DNA 或 RNA,分为细胞样品和组织样本;
2. 引物/TaqMan 探针设计与合成,分为探针法和染料法;
3. Real time 反应;
4. 预实验:荧光 PCR 体系优化;
5. 标准曲线制作,相对定量(不需),绝对定量(需要);
6. 荧光 PCR 检测,结果分析及实验报告。
❀应用
1. 起始模板的测定;
2. 基因型的分析;
3. 融解曲线分析:可以优化 PCR 反应的条件,对常规 PCR 有指导意义,如对 primer 的评价;可以区分单一引物、引物二聚体、变异产物、多种产物。
荧光定量 PCR,
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