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免疫印迹实验--Western blotting
服务内容:
从动物细胞、人或者动物组织、细菌、植物、灭活病毒等样品中提取蛋白样品。
对蛋白样品进行半定量分析
western检测
电泳:聚丙烯酰氨凝胶电泳分离蛋白样品
转膜:湿转
抗体孵育:使用抗体检测膜上的特定蛋白
信号收集:采用ECL发光法和chemidoc MP进行信号收集分析
样品要求:
细胞>1*107,组织>30mg,菌体湿重>10mg,植物>100mg,血清>50ul
服务项目及收费标准:
服务项目
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收费详情
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实验周期
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预实验
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全蛋白抽提及蛋白定量
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30/样品
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1周
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胞浆、胞核蛋白分开抽提
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50/样品
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1周
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Western Blot 检测
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500/目的蛋白
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2周
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正式实验
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全蛋白抽提及蛋白定量
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30/样品
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1周
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Western Blot检测
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1000/膜
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2周(是具体检测量)
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灰度值分析
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Chemidoc MP读取
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免费
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1周
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客户提供:
新鲜或者正确保存的样品(按照我们的要求提供)
目的蛋白的一抗,
阳性对照(尽量提供),
相关文献
提供给客户:
预实验的检测结果(扫描图片),预实验采用1-3个一抗稀释度;
正式实验结果(扫描图)
完整的实验报告
灰度值分析(可选)
服务说明
提供的蛋白量与目的待检测的蛋白数量有关,蛋白数量增加相应的样品量也要增加;
胞浆蛋白和胞核蛋白样品来源为:哺乳动物细胞。
每张膜样品数量为1-8个(10孔胶)或者1-13个(15孔胶),不足一张膜的按一张膜收取;
以10孔胶为例:
7个样品,1个蛋白抗体,算1张膜;9个样品,1个蛋白抗体,算2张膜;
7个样品,2个蛋白抗体,算2张膜;9个样品,2个蛋白抗体,算4张膜;
如客户有特殊上样要求,按涉及的实际膜数量进行计算。
选取部分样品进行预实验,参考蛋白一抗说明书进行3个稀释度抗体的预实验。
向客户反馈预实验结果,等待客户反馈后进行是否进行正式实验。
请客户提供有质量保证的一抗。抗体的使用量通过预实验后进行确认,不回收利用一抗。
需要对膜上蛋白进行剥离进行重复使用膜的,请事先说明;
建议提供蛋白的阳性对照品;
免费提供普通内参:beta-actin,GAPDH,beta-tubulin;
如需进一步数据分析,条带灰度值的读取,以及符合论文发表,请另询价;
对条带结果有特殊要求的,请另询价;
双方签订合同后,收取70%的款项后启动实验;
WB特殊要求请咨询。
免疫印迹实验--Western blotting,
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