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载体特点 能够高效传递和表达基因的能力;具有宿主范围广、对人致病性低;在增殖和非增殖细胞中感染和表达基因;能有效进行增殖、滴度高;与人类基因同源;不整合到染色体中,无插入致突变性。适用于难转染的细胞(如原代/非分裂期细胞)。
服务流程1.客户提供:表达miRNA/shRNA的质粒(提供测序图谱)或者所要Konckdown的靶基因的名称、序列;所需的病毒滴度及总量、病毒是否需要纯化;若需要检测靶基因的表达变化,如需要请提供相应的抗体。2.构建含有miRNA/shRNA的腺病毒载体,采用PacI消化纯化质粒使ITRs暴露出来;3.将腺病毒表达载体转染293A细胞,收获细胞以制备病毒粗提液;4.将病毒粗提液感染293A细胞以扩增病毒,确定病毒滴度;5.将病毒上清加入靶细胞;6.分析miRNA/shRNA的表达和相应的Knockdown结果7.我们提供:重组后的腺病毒载体质粒,并附上PCR鉴定结果;提供已测定的滴度、可以直接进行后续分析的腺病毒储存液。
腺病毒RNAi干扰服务,
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