Hairpin-it^TM miRNAs qPCR Quantitation Assay原理

Hairpin-it^TM miRNAs qPCR Quatitation Assay 包括两步

1.      Stem-loop RT                                2. Real-time PCR

A.      Stem-loop RT primer 与miroRNA 分子的3’端结合，然后用逆转录酶将RNA逆转录成cDNA;

B.      将得到RT产物与miroRNA特异引物以及荧光标记的Molecular Beacon probes一起进行优化的real-time PCR反应。

Hairpin-it^TM miRNAs qPCR Quantitation Assay原理

Hairpin-it^TM miRNAs qPCR Quantitation Kit

目录号

规格

价格

QPM-010

100 rxns

￥1,000

QPM-011

200rxns

￥1,600

QPM-012

300rxns

￥2,500

QPM-013

500 rxns

￥3,000

□产品特点

Ø 高度特异性的miRNA Hairpin primer；

Ø 只对成熟MicroRNAs进行定量，不受其前体干扰；序列高度同源的miRNAs也可精确区分；

Ø 灵敏度极高，仅需1-10ng的total RNA或同等物；

Ø 超宽的定量线性范围，可跨越7个数量级，从几个拷贝一直到几百万个拷贝；

Ø 可实现对每个细胞所含目标miRNA分子进行准确定量;

Ø 试剂盒内含合成的miRNA标准品一支。

□适用的荧光定量PCR仪器

   ABI PRISM 7000/7300/7500/7900

   MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列、MX3000p/4000

   Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogene3000、FTC-2000

□试剂盒组成（40µl×100 rxns）

Real-time PCR Master Mix（5×）*      1ml×1支

miRNA Hairpin-primer Set（10µM）   100µl×1支

miRNA RT primer（10µM）           15µl×1支

Taq DNA polymerase （5U/µl）        50µl×1支

Synthetic miR-16 Standard                   1支

1X RNA Dilution buffer                1ml×2支

*内含dNTP Mixture，Mg^2＋,SYBR Green1等。

□试剂盒的保存

-20℃ 避光保存，避免反复冻融。保质期6个月。