Hairpin-it Real-Time PCR miRNAs定量检测方法

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吉玛公司 microRNAs 定量PCR检测解决方案

Hairpin-it^TM miRNAs qPCR Quatitation Assay 包括两步

1. Stem-loop RT 2. Real-time PCR

A. Stem-loop RT primer 与miroRNA 分子的3’端结合，然后用逆转录酶将RNA逆转录成cDNA;

B. 将得到RT产物与miroRNA特异引物以及荧光标记的Molecular Beacon probes一起进行优化的real-time PCR反应。

Hairpin-it^TM miRNAs qPCR Quantitation Assay原理

Hairpin-it MicroRNAs Quantitation PCR的特点

高度特异，特异性的Stem-loop RT primer与miR-specific Molecular Beacon probe双重保证，确保反应不受其前体及其他因素干扰；序列高度同源的miRNAs也可精确区分；
超宽的定量线性范围和高度检测灵敏度，从几个拷贝一直到几万个拷贝，定量线性范围跨越7个数量级；
样品消耗量少，仅需1-10ng total RNA；
适用的样品范围广，total RNA、细胞裂解物以及纯化的RNA都可以用于qRT-PCR 的模板，即使基因组DNA的污染也不会干扰miRNA的定量；
金牌质量的miRNA标准合成物，即可精确用来作标准曲线绝对定量之用，又可用来作相对定量的阳性对照
操作快速简单，可实现RT与PCR反应一步完成；
重复性好，经过吉玛公司经验丰富的技术人员严格的质量检验。

Hairpin-it^TM miRNAs qPCR Quantitation Kit
		目录号	规格	价格
		QPM-010	100 rxns	￥1,000
		QPM-011	200rxns	￥1,600
		QPM-012	300rxns	￥2,500
		QPM-013	500 rxns	￥3,000
	□产品特点 Ø 高度特异性的miRNA Hairpin primer； Ø 只对成熟MicroRNAs进行定量，不受其前体干扰；序列高度同源的miRNAs也可精确区分； Ø 灵敏度极高，仅需1-10ng的total RNA或同等物； Ø 超宽的定量线性范围，可跨越7个数量级，从几个拷贝一直到几百万个拷贝； Ø 可实现对每个细胞所含目标miRNA分子进行准确定量; Ø 试剂盒内含合成的miRNA标准品一支。 □适用的荧光定量PCR仪器 ABI PRISM 7000/7300/7500/7900 MJ-opticon、Opticon2及Chromo4 系列、MX3000p/4000 Bio-Rad IQ系列、Light Cycler、Rotogene3000、FTC-2000
□试剂盒组成（40µl×100 rxns） Real-time PCR Master Mix（5×）* 1ml×1支 miRNA Hairpin-primer Set（10µM） 100µl×1支 miRNA RT primer（10µM） 15µl×1支 Taq DNA polymerase （5U/µl） 50µl×1支 Synthetic miR-16 Standard 1支 1X RNA Dilution buffer 1ml×2支内含dNTP Mixture，Mg²^＋,SYBR Green1等。 □试剂盒的保存* -20℃ 避光保存，避免反复冻融。保质期6个月。

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注：该产品未在中华人民共和国食品药品监督管理部门申请医疗器械注册和备案，不可用于临床诊断或治疗等相关用途

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