【月旭应用】食品中苯甲酸与山梨酸的测定

适用于肉制品、红酒中苯甲酸与山梨酸含量的检测。

苯甲酸标准储备液（1mg/mL）：称取苯甲酸标准品50mg，置于50ml容量瓶中，加入2.5ml乙醇溶解，用水定容至刻度。

山梨酸标准储备液（1mg/mL）：称取山梨酸标准品50mg，置于50ml容量瓶中，加入2.5ml乙醇溶解，用水定容至刻度。

苯甲酸、山梨酸混合标准工作液（10μg/mL）：分别量取1mg/mL苯甲酸标准储备液1.0mL、1mg/mL山梨酸标准储备液1.0mL至100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。

洗脱液：甲酸/甲醇水=2/98（8：2）：量取甲醇400mL、水100mL混匀，该溶液即为80%甲醇水；取490mL 80%甲醇水，加入10mL 甲酸，混匀，该溶液即为洗脱液。

磷酸盐缓冲溶液（流动相）：分别称取2.5g KH2PO4、2.5g K2HPO4于1L容量瓶中，加水定容至刻度。

一、熟牛肉：

称取1g样品，于50ml离心管中，加入2ml三氯甲烷，10ml水，充分匀浆后8000rpm/min 离心5min。取上清液待净化。另使用15ml水清洗匀浆机刀头，清洗液倒入样品残渣中再提取一次，8000rpm/min 离心5min，合并两次上清液待净化。

二、红酒

量取1ml样品，加入0.5mL 1mol/L氢氧化钠溶液，待净化。

SPE柱：月旭Welchrom® P-SAX，规格：200mg/6mL。

活化：5mL甲醇，5mL水，弃去

上样：待净化液全部上样，弃去

淋洗：5mL水（润洗离心管），弃去，抽干

洗脱：5mL洗脱液，收集于15ml离心管中，抽干

50℃氮吹至约500μL，用流动相定容至5ml，上HPLC检测。

色谱柱：月旭Ultimate®XB-C18（4.6 x 250mm, 5μm）

流动相：磷酸盐缓冲溶液/乙腈=(9/1)

流速：1.2mL/min

柱温：30℃

进样量：20μL
检测波长：227nm；

图1.苯甲酸、山梨酸标准品2.0mg/L谱图

表1：相关峰信息

图2.苯甲酸、山梨酸标准品0.2mg/L谱图

图3.苯甲酸+山梨酸标准品0.05mg/L谱图

图4.熟牛肉空白色谱图

图5.熟牛肉样品加标10mg/kg谱图

图6. 熟牛肉样品加标1mg/kg谱图

图7. 熟牛肉样品加标0.25mg/kg谱图

图8.红酒空白色谱图

图9.红酒样品加标10mg/L谱图

图10. 红酒样品加标1mg/L谱图

图11. 红酒样品加标0.25mg/L谱图

表2：熟牛肉样品加标回收率

表3：红酒样品加标回收率