解决方案|液相色谱法测定乳制品中泛酸含量

2022-02-19 08:45:22 北京东西分析仪器有限公司

前言

泛酸又名维生素B5，是一种重要的水溶性维生素，是脂肪酸合成类固醇所必需的物质，可参与亚铁血红色素、抗体等的合成。国标GB5413.17-2010《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中泛酸的测定》中规定泛酸是婴幼儿乳粉中必须添加的物质，准确快速测定其含量有着重要意义。

目前测定泛酸的方法主要有比色法、微生物法和高效液相色谱法等。其中比色法适用于药品等含量高的样品；微生物法适于各类样品，但测定步骤繁琐，测定周期长；而高效液相色谱法因其操作简便、测定快速、结果准确等特点，更适于样品中泛酸含量的测定。本文利用东西分析液相色谱仪参考GB5413.17-2010建立乳品中泛酸测定的液相色谱法，供相关人员参考。

LC-5520液相色谱仪

PART ONE

实验部分

实验原理

试样经热水提取等前处理后，经C18色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法定量泛酸的含量。

仪器设备与试剂

LC-5520 液相色谱仪（紫外检测器）；

AS-405 自动进样器；

DM-101 在线脱气机；

淀粉酶；

甲醇：色谱纯；

盐酸；

硫酸锌；

磷酸二氢钾；

磷酸；

泛酸标准品。

实验条件

色谱柱: C18 (4.6X250mm,5μm)；

流动相：磷酸二氢钾溶液（0.05mol/L）+甲醇=8+2,0.45μm微孔滤膜过滤；

流速：1.0mL/min；

柱温：30℃；

检测波长：200nm；

进样量：20μL。

样品前处理

称取混合均匀的固态试样约5 g或液态试样约20 g（精确至0.0001 g）于150 mL三角瓶中，固体试样加入约30 mL 40 ℃～50 ℃温水，振摇溶解后超声萃取20 min。（若样品中含有淀粉，称取样品后加入淀粉酶约0.2 g, 固体试样加入约30 mL 40 ℃～50 ℃温水振摇溶解，盖上瓶塞，在50 ℃～60 ℃条件下酶解30 min）。试样溶液降至室温后，用0.1 mol/L盐酸调节 pH至 4.5 ± 0.1，加入 5 mL 硫酸锌溶液，充分混合。转入 100 mL 容量瓶中，用水定容至刻度并充分混匀后，用滤纸过滤。滤液经 0.45 μm滤膜过滤后即为试样待测液。

PART TWO

实验结果

谱图

PART THREE

实验总结

本文参考GB5413.17-2010建立乳品中泛酸测定的液相色谱方法。该方法简单、快速，样品经沉淀蛋白质后直接用滤纸过滤，无需进行离心分离。同时在流动相的选择中，磷酸二氢钾与甲醇按8:2比例，泛酸可以得到有效分离。综上所述，该方法是测定泛酸含量较理想的方法。同时，该方法操作简便、易于掌握，可作为常规检验方法应用。

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