荧光定量PCR技术在产前诊断中的应用与专家共识

1.1 TORCH（风疹、巨细胞、单纯疱疹Ⅱ、B19病毒、弓形虫）感染检测： 孕期母体TORCH感染可导致病毒通过胎盘或产道传播感染胎儿，引起早产、流产、死胎或畸胎等，以及引起新生儿多个系统、多个器官的损害，造成不同程度的智力障碍等症状。特别在怀孕初的三个月胚胎处于器官形成期，此时受病毒感染，可破坏细胞或抑制细胞的分裂和增殖。器官形成期以后感染病毒，可破坏组织和器官结构，并可形成持续感染，出生后继续排毒，能引起相应的病变。TORCH的感染影响着人口素质，与优生优育有重要关系。通过荧光定量PCR技术进行产前诊断排除胎儿宫内感染，获得正确的产前诊断结果，从而避免盲目终止妊娠。

1.2 B族链球菌（GBS）的感染检测：孕期B族链球菌引起早产、胎儿发育不良（低体重儿）、胎膜早破及晚期流产，在分娩过程中还可通过产道感染新生儿，引起新生儿败血症、肺炎、脑膜炎，甚至死亡。在感染后存活的新生儿，可能伴有严重的神经系统后遗症，包括脑积水、智力障碍、小头畸形、耳聋等。因此，通过荧光定量PCR技术及时诊断B族链球菌的感染，有助于及早通过抗生素预防有效降低GBS垂直传播引发新生儿早期侵入性感染。

到目前为止，人们对遗传性物质改变引起的遗传性疾病还无法治疗，只能通过产前检测，减少病婴出生，以防止各类遗传性疾病的发生。

2.1珠蛋白生成障碍性贫血检测

又称地中海贫血，是一组遗传性溶血性贫血疾病，由于遗传的基因缺陷致使血红蛋白中一种或一种以上珠蛋白链合成缺如或不足所导致的贫血或病理状态，地中海贫血大多婴儿时即发病，表现为贫血、虚弱、腹内结块，发育迟滞等，重型多生长发育不良，常在成年前死亡。通过荧光定量PCR方法，实现地中海贫血高风险胎儿产前基因诊断快速、准确。

2.2耳聋基因检测

目前已经应用于临床的致聋基因检测包括线粒体基因（12SrRNA）、GJB2基因、PDS基因、GJB3基因等。线粒体（12SrRNA）基因发生突变后，使用氨基糖苷类药物会引起药物性耳聋；GJB2基因突变会导致先天性听力缺失，中国先天性耳聋患者中携带有GJB2基因突变的约占21％；PDS基因突变可以导致大前庭水管综合征；GJB3基因突变相对较少。通过荧光定量PCR进行上述4种致聋基因诊断，可以明确大部分遗传性耳聋的原因，对于有生育耳聋患儿风险的夫妇意义重大 。

2.3 G6PD缺乏症检测

俗称蚕豆病，是遗传性葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症是最常见的一种遗传性酶缺乏病，属X连锁不完全显性遗传，常因食用蚕豆、服用或接触某些药物、感染等诱发血红蛋白尿、黄疸、贫血等急性溶血反应，如不及时处理，可引起肝、肾、或心功能衰竭，甚至死亡。G6PD缺乏症主张预防性用药，可通过产前诊断明确。

荧光定量PCR 技术是快速靶向分子诊断技术，主要 针对 21、18、13、X 和 Y 共 5 种染色体的数目异常，不能检测出所有的染色体异常。荧光定量PCR 技术对高风 险染色体异常(可导致异常临床表现)的漏诊风险是临床应用研究中关注的重点。Speevak 等发现，在所有的产前诊断适应证下，QF-PCR 技术能检测 出 98.5%的高风险染色体异常，如果把超声检查结 果异常的适应证排除在外，则可以检测出 99.92%的高风险染色体异常。

荧光定量PCR技术虽然不能检测完整核型，但它与其他细胞遗传学分子诊断技术同时应用，可获得13、18、21、X、Y等染色体数目的信息，有助于排除常见染色体异常情况，辨别是否存在母体细胞污染，或对其他分子诊断技术的检测结果进行验证等，是一项性价比较高的产前分子遗传学诊断技术，有良好的应用前景。

目前，已经发现的三百多种X连锁隐形遗传疾病中，只有少数能进行精确的DNA突变检测，对此类疾病患者进行性别鉴定，避免了男性患病胎儿的出生，对优生优育具有重要意义。如在性别鉴定中对Y染色体的TSPY基因及X/Y染色体上的U2基因进行荧光定量PCR检测，判断胚胎是否处于坏死或凋亡的早期阶段，选择适宜胚胎移植。