1、仪器

SPE400全自动机械臂固相萃取仪；HN200多功能氮吹仪；高效液相色谱仪；索氏提取器；样品筛（18目）；分析天平；离心机；其他常规玻璃仪器；滤膜（有机相，0.22μm）。

2、试剂及耗材

实验用水应符合GB/T6682中三级用水的规格，使用试剂除特殊说明外，均为色谱纯。

正己烷（色谱纯）；乙腈（色谱纯）；二氯甲烷（色谱纯）；丙酮（色谱纯）。硅胶固相萃取柱：1000mg/6mL。标准溶液：苯并芘100μg/mL，乙腈作为溶剂。

丙酮-正己烷溶液：用丙酮和正己烷按1:1的体积比混合。

无水硫酸钠：干燥剂，置于马弗炉中400℃烘4h，冷却后置于磨口玻璃瓶中密封保存。

二氯甲烷-正己烷混合溶液：用二氯甲烷和正己烷按1:1的体积比混合。

1、取样

取适量样品进行风干，除去样品中枝棒、叶片、石子等异物，研磨，过筛。

2、提取

在制备好的滤纸筒中加入10g样品和5g无水硫酸钠，将滤纸筒放入索氏提取器中。加入100mL丙酮-正己烷混合溶液，萃取16h。

3、过滤、脱水及浓缩

将提取液用无水硫酸钠除水。用适量丙酮-正己烷混合溶液洗涤提取容器3次，再用适量丙酮-正己烷混合溶液冲洗漏斗，洗液并入浓缩器皿。用HN200多功能氮吹仪进行浓缩至1mL。加入约3mL乙腈，再浓缩至1mL，将溶剂完全转化为乙腈。

4、固相萃取柱净化（硅胶柱）

表1 固相净化条件

浓缩、转化溶剂：氮吹浓缩至1mL，加入约3mL乙腈，再浓缩至1mL以下，将溶剂完全转换为乙腈，并定容至1.0mL，滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

5、色谱测定条件

色谱柱：C18，粒径5μm，柱长250nm，内径4.6mm；

流速：1.0mL/min；

柱温：25℃；

进样体积：10μL；

流动相：A乙腈；B水，梯度如下表：

表2 梯度表

检测波长：苯并（a）芘 激发波长280nm；发射波长420nm。

6、方法准确度和精密度测定

在石英砂（无苯并芘的土壤代替物）添加苯并芘标准溶液，对石英砂进行5μg/kg，10μg/kg，20μg/kg,每个浓度4个平行样。利用外标一点法计算加标回收率见表3。

7、定性分析和定量分析

以目标化合物的保留时间定性；以外标法定量。

1、实验结果

图1 样品色谱图

图2 样品色谱图

表3 样品回收率和RSD数据结果

由图1和图2可知，样品中未检测出苯并芘。由表3可知，采用外标法进行定量得到的回收率和相对标准偏差(RSD)符合《HJ 784-2016 土壤和沉积物 多环芳烃 高效液相色谱法》中的要求。

2、结论

1、采用SPE200全自动机械臂固相萃取仪可以快速对样品提取液进行净化和富集，可做到无人看守、批量处理，省去实验员繁琐的加液取液等人工操作，方便快捷。

2、采用SPE200全自动机械臂固相萃取仪对样品提取液可以精准的控制进样、加液等流速，有利于固相小柱进行萃取分离，从而实现较好的样品检测重复性。