看HPLC-CAD法如何让假冒蜂蜜无处遁形

蜂蜜营养丰富，口感香甜，是不少人喜爱的健康食品。蜂蜜含有人体需要的大部分矿物质和各种维生素、有机酸、氨基酸、生长素等营养物质，广泛适用于儿童、女性、中老年等各阶层的人群，是一种老少皆宜的保健食品。

但如今，假冒伪劣产品鱼目混珠、充斥市场，且名目繁多，令消费者难辨真假，香港消委会的一项蜂蜜检测结果显示市场上在售的蜂蜜，掺假比例竟高达六七成。

图1 市场上销售的各种蜂蜜

近年来常用的蜂蜜掺假手段中，利用果葡糖浆掺假，形式最为普遍。果葡糖浆是由植物淀粉水解而制得，如玉米或红薯淀粉，加工简单，成本低廉。蜂蜜中不含五糖（DP = 5）以上的寡糖，但在果葡糖浆中却广泛存在。2015版药典中蜂蜜检查项采用薄层色谱法对寡糖进行鉴别，该方法要依靠实验人员的直观经验来判断，误差较大、灵敏度差，存在很大的局限性。

而国内外已建立的一些方法采用碳同位素法，仪器昂贵、操作复杂、难以普及。本方法采用Thermo U3000高效液相色谱仪进行分离，电雾式检测器（CAD）检测，将五糖（DP = 5）以上寡糖的存在作为蜂蜜中果葡糖浆的判定指标，采用氨基柱分析不同聚合度的麦芽糖，方法灵敏度高，并且具有很好的普及性。

通用型质量检测器CAD，是一种新型原理的，高灵敏度，操作简单的检测器，能检测到大部分非挥发性和半挥发性的有机物，该检测器用于糖的检测，较示差检测器灵敏度更高，而且适用于梯度洗脱条件。

图2 不同聚合度的麦芽糖对照品测定谱图

实验采用乙腈和水（65 : 35）流动相等度洗脱，流速1.2mL/min， Shodex Asahipak  NH₂P-50 4E色谱柱  (4.6 × 150 mm，5 mm)进行分离，Corona Veo RS检测器采集频率5Hz，蒸发温度35 ℃，Filter 5。

鉴于蜂蜜样品中果糖和葡萄糖含量较高，在进行实际样品测定时，我们采用Corona Veo RS检测器阀切换功能使这两个高浓度的糖不进入检测器检测，只检测聚合度大于等于5的糖。对于不带阀的常规Corona Veo检测器可以通过外置阀来实现该功能。

图3 阀切换条件

图4 果葡糖浆及蜂蜜样品测定谱图

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