蛋白质印迹法的作用

蛋白质印迹法(Western Blot,WB)又称免疫印迹法,是一种基于抗原抗体的原理利用聚丙烯凝胶电泳研究目的蛋白质表达特性、表达水平、组织定位以及与其他蛋白质相互作用的试验方法。其基本原理是将经聚丙烯凝胶电泳分离后的蛋白质样品从凝胶中转移到承载有能与目标蛋白(抗原)特异性结合的抗体(一抗)的固相载体如NC膜或PVDF膜上,此时目标蛋白与附着在载体上的特异......

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免疫印迹法的原理是基于抗原和抗体特异性结合的原理,其关键步骤主要包括:电泳分离、转印、封闭、抗体孵育、洗涤、显色。首先,通过SDS-PAGE电泳,使目标蛋白质在凝胶中做垂直运动,达到分离。然后,把蛋白质转印到具有高亲和力的膜(如聚偏氟乙烯膜或硝酸纤维素膜)上。接着,用封闭液(通常是5%脱脂奶粉或牛血清白蛋白)封闭膜上未与蛋白质结合的部......

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