过表达miRNAmiRNA过表达细胞内载体过表达是常用的过表达miRNA方式。过表达pri-miRNA序列如下图,miRNA的过表达载体中有插入成熟miRNA、pre-miRNA及pri-miRNA序列三种形式。其中pri-miRNA(含侧翼序列)的方式由于保留了每个microRNA独自的原始天然双臂结构,效果更好,是应用最为广泛的方法。 &nbs......
hsa-mir-21过表达载体构建 摘要:以人基因组DNA为模板扩增hsa-mir-21前体序列,并构建入慢病毒载体pGIPZ。在该载体中hsa-mir-21前体序列被插入到tGFP以及puromycin抗性基因的3‘UTR区。tGFP利于后续的表达观测, 而puromycin抗性基因则利于稳定细胞株的筛选。测序证实载体构建成功,该载体既可用于瞬......