利用抗原抗体反应,验证两种蛋白在细胞内是否结合,通常同于直接互作机制的研究。技术原理以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的、用于研究蛋白相互作用的经典方法。是确定两种蛋白在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在argarose beads上的蛋白质A的抗体免疫......
IP 和Co-IP 免疫沉淀是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后,再与Protein A/G或二抗偶联的agaose或Sepharose beads孵育,通过离心得到beads-protein A/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物,沉淀经洗涤后,重悬于电泳上样缓冲液,煮沸5-10 min,......
Co-IP(Co-Immunoprecipitation)基于抗体和抗原之间结合的专一性用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是研究两种蛋白在细胞内的相互作用方法。基本原理是:细胞在非变性条件下裂解,胞内的蛋白通过抗体结合,以此为饵蛋白,免疫共沉淀调取与饵蛋白结合互作的靶标蛋白,洗脱得到蛋白产物,用于WB检测......
免疫共沉淀 Co-IP 背景知识: 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完......
免疫共沉淀(Co-Immunoperecipation)是基于抗体和抗原之间结合的专一性用于研究蛋白质相互作用的经典方法。原理简介:细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在许多蛋白与蛋白质之......
免疫共沉淀(CO-IP) 定义 免疫共沉淀(co-immunoprecipitation)是用抗体将相应特定分子沉淀的同时,与该分子特异性结合的其他分子也会被带着一起沉淀出来的技术。这种技术常用于验证蛋白质之间相互特异性结合。 原理 ......
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 免疫共沉淀的优势: 与其他研究蛋白质相互作用技术(如GST-Pull down、酵母双杂交等)相比,免疫共沉淀鉴定的相互作用蛋白是在细胞内与目的蛋白发生的天然结合,避免了......