毛细管电泳分离测定依诺肝素水解产物

2025-05-28 16:11:33, Unimicro 上海通微分析技术有限公司




01

背景介绍

低分子量肝素是普通未分级肝素通过酶解或化学降解得到。与未分级肝素相比,低分子量肝素具有出血少、生物利用度高和抗凝效果可预测等优点,更广泛用于治疗和预防血栓栓塞。由于化学生产方式会导致低分子量肝素结构发生变化,因此,其组分和序列更为复杂。
依诺肝素是常用低分子量肝素之一,研究表明,依诺肝素的组分结构与其生物活性密度相关,结构分析是深入了解其与功能关系的起点。因此,对依诺肝素水解后17种寡糖的分离检测,为其组分分析提供方法参考。


02

测试条件

仪器
通微CE-1000毛细管电泳分离系统,配备UV-Vis紫外可见检测器(190-700nm)
石英毛细管
50μm i.d 360μm o.d (总长86cm)
缓冲液
含有PEG10000和MgCI2的Tris-H3PO4缓冲液
运行电压
-28kV
进样
50mbar x 10s
UV/Vis检测器
232nm



03

测试结果

该方法可以实现17种寡糖(包括10种二糖、1种三糖、2种四糖和4种1,6-环苷寡糖)的有效分离。
图1 依诺肝素水解产物毛细管电泳分离图


04

结论

采用通微CE-1000毛细管电泳系统结合紫外-可见毛细管柱上检测器,可实现依诺肝素水解后17种不同的寡糖组分的有效分离检测。该方法在依诺肝素的组分分析中具有分离效率高、分析时间短以及样品和试剂的消耗少等优势,在大规模测试中有很大的应用潜力。


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配置列表

仪器配置
通微CE-1000毛细管电泳系统(标配紫外-可见毛细管柱上检测器,高压电源,选配石英毛细管、毛细管冲洗手动泵、毛细管检测窗口烧结器等
通微Unimicro ChromStation色谱工作站


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