水灵灵火出圈！沃特世用于GLP-1的SE-UPLC色谱柱全新上市

图1. 使用USP <121.1>和EP规定的SEC变性洗脱液（1 g/L L-精氨酸水溶液、乙酸、乙腈，65/15/20，pH 2.4），在推荐的HPLC色谱柱上进行人胰岛素分离，该色谱柱需经过100 mL的柱活化才能获得可靠的结果（左图），而配备MaxPeak Premier的Waters ACQUITY 125 Å SEC色谱柱则可实现“开箱即用”的性能，表现出相当的组分分离度和分离组分定量能力（右图）。

图2. 使用MaxPeak Premier高性能表面技术有助于大幅减少生物分子与色谱柱硬件之间的次级相互作用。

图3. 在Premier UPLC系统上，使用变性SEC洗脱液（见图1）分析人胰岛素样品（上样量14 µg）。竞品色谱柱（下图）获得的HMWP回收率仅为Waters ACQUITY 125 Å SEC色谱柱（采用MaxPeak Premier HPS技术）的40%。

图4. 使用变性SEC洗脱液，在ACQUITY 125Å SEC 1.7 µm色谱柱（MaxPeak Premier）和XBridgeTM Premier SEC 125 Å 2.5 µm色谱柱上进行胰岛素分析（见图1）。

图5. GLP-1受体激动剂（例如利拉鲁肽和索马鲁肽）在非变性配方洗脱液中以非共价寡聚物的形式存在，这些寡聚物会在使用变性洗脱液进行SEC分析时解离。在这两种分离方法中添加MALS检测手段，可以在这些生物治疗性肽的发现、制剂开发及生产过程中提供关键信息，满足监管机构的要求。

图6. 使用ACQUITY 125 Å SEC色谱柱（MaxPeak Premier，1.7 µm），在变性SEC条件下通过MALS检测器分离利拉鲁肽和索马鲁肽（见图1）。

图7. 在非变性SEC条件下，使用ACQUITY 250 Å SEC色谱柱（MaxPeak Premier，1.7 µm）结合MALS检测，对利拉鲁肽和索马鲁肽进行分离的结果。SEC-MALS分析结果表明，利拉鲁肽存在两种寡聚物状态，其中六聚体为主要组分，十三聚体为次要组分，而索马鲁肽则主要以三聚体和四聚体复合物的形式存在。

图8. GLP-1的寡聚化对非变性SEC分离条件非常敏感，这种敏感性通过SEC中pH值和离子强度的微小变化表现出来。