2024-11-15 18:10:24, 求点亮大拇哥的 益世科生物(Esco Lifesciences Group)
在长期的实践和探索中,科学家们发展出了多种细胞冻存方法,每种方法都有其独特的优势和不可避免的缺点。
01*
冰箱梯度转移降温法
冰箱梯度转移降温法无需耗材和设备,实验室有冰箱和超低温冰箱即可实现。然而,这种方法也存在一定的局限性。由于冰箱自身的特性,其温度容易产生较大幅度的波动,无法对相变点做补偿,冻存效果不可控。
02*
程序降温盒
仅需要程序降温盒和超低温冰箱,即可按1℃/min的速率降温,冻存效果不错,是科研实验室的首选。不过,该方法也存在一些不足之处,它无法针对细胞冻存时的相变点进行补偿,同时也不能提供降温数据。
03*
程序降温仪
可以设定降温程序进行稳定降温和相变点补偿,并提供降温数据,以便审计追踪。但设备和使用成本较高,多见于细胞治疗相关企业。
Esco 程序降温仪具有操作便捷的特点,能达到极佳的冻存效果,以下是其主要的使用流程以及相关的注意事项。
运行条件
1、液氮补给罐液氮余量需≥50L(单次消耗液氮约12-15L)。
2、压力表读数在0.05Mpa-0.1Mpa,若压力不足,可打开增压阀。
如何正确安装使用呢?
1
用扳手链接好补给罐
2
接通电源,按下电源开关,打开液氮补给罐的排液阀
3
触摸屏上会显示如下图界面
4
选择右上角对应程序运行,如果程序不涵盖对应样品,也建议选默认程序先摸索
5
6
待腔室温度到4℃,界面会提示放入样品,参照样品冻存管装上温度探头,待样品温度降到4℃时,再
7
程序结束后,尽快转移样品到气相液氮罐中
在操作Esco程序降温仪时,还需要注意哪些问题以确保冻存效果?
• 选择适合的冻存架和样品温度探头。对照样品的冻存管,可在管帽上钻一个小口,以便放入温度探头,血袋温度探头需用低温胶带粘于血袋样品上,并与血袋充分接触;
• 冻存管样品探头插入深度至少为样品内1/2,探头尖端尽量不接触管壁;
• 相变点若提前或延迟出现,可适当调整第二步的终点温度;
• 复苏率是检验冻存是否成功的标准,有时即使曲线异常,但只要复苏效果好,可不关注降温曲线,完成后快速转移样品至液氮罐,谨防升温;
• 近距离转移样本,或放冻存容器中转移;
• 降温程序跟细胞类型相关性不大,主要是由冻存液和冻存液体积决定的,为了降温程序的稳定,对照样本的冻存液建议不要重复使用3次以上;
• 程序降温仪使用超1年后,建议对温度探头做校准。
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