稳定性同位素标准品-4.氨基酸Waters MetaboQuan-R™ 方法（UPLC-MS/MS）

概述

【Waters】

      用于人血清中氨基酸的MetaboQuan-R：一种适用于代谢组学研究的快速、靶向UPLC-MS/MS方法

■ 可在4 min内通过单次运行同时分析29种氨基酸

■ 高通量分析意味着可以对更多的样品组进行快速分析

■ 快速分离同分异构体

■ 利用通用型LC-MS配置实现从一种化合物到另一种化合物的多功能切换

图1. 人血清中主要氨基酸异构体的分离结果。

      使用Waters™ AccQTag包制备人血清样品。使用磺基水杨酸对样品进行破碎处理，然后按步骤进行衍生化。

     采用配有CORTECS T3 2.7 µm (2.1 × 30 mm)分析柱的ACQUITY UPLC I-Class系统（固定定量环）进行UPLC分离。以1.3 mL/min 的流速进样2 µL。流动相A为含0.01%甲酸的水溶液，流动相B为 50%异丙醇（溶于含0.01%甲酸的乙腈中）。2.4分钟内将流动 相B由1%梯度增加到8%进行分离处理，再用98%流动相B清洗 色谱柱0.9分钟。接下来重新平衡色谱柱，使其恢复初始条件。 分析柱温度维持60 °C。 

     使用Xevo TQ-S micro质谱仪进行多重反应监测(MRM)分析。所 有实验均在正离子电喷雾电离(ESI+)模式下进行。离子源温度和 毛细管电压保持不变，分别设置为150 °C和2.0 kV。锥孔气流速 为50 L/h，脱溶剂气温度为650 °C。 

      利用MassLynx中的Quanpedia功能将方法信息导入LC-MS系 统。这款可拓展且可搜索的数据库不仅可以生成LC和MS方法， 还能生成在TargetLynx中用于化合物定量分析的处理方法。

      使用文中所述LC-MC平台和提取方案分离并检测出29种氨基酸，如表1所示。图1展示了使用上文详述的UPLC方法实现主要同分异 构体分离的示例色谱图。