Pull-down应用：琼脂糖链霉亲和素磁珠助力心血管疾病研究！

链霉亲和素磁珠（BeaverBeads^®  Magrose Streptavidin Cat.22321）结合生物素化的消皮素D抑制剂Y1（Gasdermin D inhibitor Y1， GI-Y1），特异性识别消皮素D（Gasdermin D ，GSDMD），GI-Y1 与 GSDMD 结合，并通过靶向 Arg7 残基抑制 GSDMD-N 的脂质结合和焦亡孔形成，阐明了GI-Y1抗细胞焦亡中的分子机制，为心血管疾病治疗提供新的治疗思路。

温州医科大学附属第一医院黄伟剑主任团队在Bisic Research In Cardiology（IF:11.981）发表论文Novel GSDMD inhibitor GI‑Y1 protects heart against pyroptosis and ischemia/reperfusion injury by blocking pyroptotic pore formation。该文章主要介绍了特异性靶向GSDMD的新型小分子抑制剂GI-Y1，并阐明了GI-Y1抗细胞焦亡中的分子机制以及抗心肌缺血再灌注损伤的药理作用。

本研究利用Pull-down实验，证明GI-Y1和GSDMD间的互作。BeaverBeads^®  Magrose Streptavidin磁珠结合生物素标记GI-Y1，形成磁珠-bio-GI-Y1复合物，之后该复合物和不同样本孵育，进行Pull-dowm分析。样本包括纯化的GST-hGSDMD蛋白（图1C）、Flag-GSDMD转染的HEK/293T细胞裂解物（图1D）、来自小鼠心肌以及人心肌的梗死区裂解物（图1E）。Pull-Down的结果均在Bio-GI-Y1组显示出条带，证明GI-Y1和GSDMD之间的直接相互作用。

图1 链霉亲和素磁珠与生物素化GI-Y1进行的Pull-Down结果图

C：纯化的GST-hGSDMD蛋白

D：Flag-GSDMD转染的HEK/293T细胞裂解物

E：来自小鼠心肌以及人心肌的梗死区裂解物