2023-12-20 09:41:47, 沃特世 沃特世科技(上海)有限公司
美国药典(USP)通则<621>色谱法有关色谱的内容最近已更新为与欧洲药典(EP)一致。根据这次更新,沃特世对Empower软件中的某些系统适应性计算方法做了修改,包括:
分离度现在使用半峰宽来计算;
理论塔板数的英文词“Plate Count”现在改为“Plate Number”,同样使用半峰宽来计算;
信噪比计算现在需要使用空白样计算峰预计保留时间处的噪音。
我们收到不少客户询问有关信噪比计算的问题,小编现将大家关心的常见问题进行了整理并解答如下,希望对大家的工作有所帮助。
USP通则<621>更新后,Empower软件目前能否根据USP/EP/JP计算信噪比(s/n)?
答:
可以,Empower软件可以按不同药典的要求计算信噪比。USP通则<621>现在修改为与EP一致。应在空白样的预期保留时间处计算噪音。将5倍半峰宽确定一个位于预期保留时间附近的窗口。
建议的半高处因子是多少?5还是20?
答:
如果缺省值不是5,Empower软件最新版本可以非常容易调整这个参数。
如何确定该使用哪一个空白样?如何在样品组中使用多个空白样?
答:
空白必须在目标样品进样之前进样。“样品组方法”中有一个名为“空白”且带有一个复选框的字段(缺省情况下为隐藏列。选中要用来计算噪音的空白样(一个或多个)所对应的复选框。如果选择多个空白样,或者对同一个空白样执行多次进样,Empower软件将计算平均噪音,然后将其用于信噪比计算。
如果空白样的预期峰保留时间处有干扰信号,建议如何处理?
答:
您可以使用“噪音和漂移”选项卡,选择空白进样中的一个区域计算噪音。创建样品间自定义字段以确定样品的信噪比。例如,如果有一次空白进样,标签为“Blk”,则自定义字段应为:
2*(Height-(0.5*Blk.1.(Peak to Peak Noise/Scale to μV)))/Blk.1.(Peak to Peak Noise/Scale to μV)
要指定空白样中的区域,请从“s/n噪音值”列表中选择峰到峰噪音,然后在“噪音和漂移”选项卡中指定区域。
梯度导致基线倾斜是否会影响信噪比计算?
答:
会,与基线的平坦部分相比,使用基线倾斜部分计算出的噪音会更大,这会导致信噪比值偏低。如果基线是可重现的,那么计算出的信噪比一致。如果基线不可重现,建议您在计算时选择空白样基线的其他部分,并使用问题4答复中所述的自定义字段。
能否使用信噪比计算来确定检测限和定量限?
答:
可以,检测限处的信噪比通常要达到3:1,定量限处的信噪比通常要达到10:1。
在什么情况下使用“噪音和漂移”选项卡计算噪音?
答:
如果要使用目标峰所在的同一色谱图确定噪音,应使用“噪音和漂移”选项卡。如果您想创建样品间自定义字段来确定空白进样指定区域内的噪音,也可以使用该选项卡。
什么情况下可以从“s/n噪音值”下拉菜单中选择噪音?
答:
如果是计算非药典方法的信噪比,可以选择计算中要使用的噪音类型。
能否计算多次空白运行的平均信噪比,得出可接受的信噪比标准偏差,再据此来区分噪音与目标峰?
答:
标准偏差(或称sigma)表示平均值周围值的分布情况。您可以轻松生成“综合报告”,可自动计算任何数值字段(包括USP s/n)的标准偏差。另外,您也可以创建样品间自定义字段,根据平均值和%RSD自定义字段进行反向计算出标准偏差。使用自定义字段计算时,报告值将永久存储在数据库中。
Waters Empower目前提供3.8.0版本,可以充分满足最新色谱通则的使用需求。如果您想了解更多细节,可以点击往期网络直播回放进行了解。
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