呼吸道传染病核酸检测及耐药性检测方案

图1. 支原体的结构。图片来源: Designua / Shutterstock

核酸检测，大家都很熟悉，相比抗体检测具有灵敏度和特异性更高的特点，适用于多种病原体感染的早期诊断。MP 核酸检测方法，包括荧光定量 PCR、环介导等温扩增技术 (LAMP)、实时荧光等温扩增检测技术 (SAT)。

多位专家认为，今年新冠疫情后人群免疫力下降，肺炎支原体、细菌和病毒等病原体混合感染变得多发。在感染早期，采用鼻咽拭子核酸检测，能够一次性查出多种常见病原体感染情况，确定是否存在混合感染，有利于及时诊断和用药。

图2：按国家分类的耐大环内酯类肺炎支原体感染比例图，来自 JAMA Network 官网

《儿童肺炎支原体肺炎诊疗指南 (2023年版）》中指出，MP对大环内酯类抗菌药物耐药机制主要为23S rRNA 基因2063、2064或2617位点等碱基突变，其中2063或2064位点突变可导致高水平耐药。临床上可以通过测定上述位点突变判断耐药与否。

荧光定量PCR是检测单碱基突变的常用方法，提取鼻咽拭子、痰液等样品核酸，对靶位点进行扩增，具有特异性强、准确、快速等优点。此外，也可以对靶位点PCR扩增后进行DNA测序。

图3. 肺炎支原体核酸检测及耐药性检测方案。

核酸提取是核酸检测的关键步骤之一，PCR/qPCR 的灵敏度与生物样品中核酸的回收率呈正相关，同时也是核酸检测的限速步骤之一。

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