2023-09-08 10:21:48, 安捷伦细胞分析 安捷伦细胞分析事业部(BioTek)
哭了!
隔壁都在做免疫实验,
而我连抗体都不会选!
多色流式实验,
连配色都不会!
流式实验,
鸭梨山大……
随着流式细胞仪和相关染料试剂的发展,使得研究人员能够进行更复杂的多色流式实验,只需一管样品就能够更准确地研究和定义细胞群,这是流式分析领域的一个重大进展。但是,多色流式细胞术面临的最大挑战就是正确选择荧光染料组合并与合适的抗原进行搭配,从而最大限度地减少荧光溢漏和补偿,提高数据的质量和准确性。因此,我们急需一个自动和智能的流式方案设计工具。
目前市场上有一些可以指导多色流式方案设计的手动在线工具,但基本都无法根据用户的特定要求自动设计出最优的方案,最终还是需要客户花费大量时间进行荧光查看、荧光组合以及抗体查询。
为满足自动化需求,安捷伦与EasyPanel合作在官网上推出全自动抗体方案创建工具,它可以全自动设计最优的多色方案,并同步提供抗体信息。
EasyPanel
EasyPanel 是一款智能化、自动化的流式细胞术Panel设计器。只需简单设置便可在数秒内设计出多达几十种颜色的流式方案,用户还可以手动编辑设计好的Panel,结合自身条件和要求得出最优的多色流式方案。
EasyPanel的专有算法在流式方案设计过程中考虑了许多因素,包括:
01
根据客户的仪器配置参数设计方案
02
最大限度地减少荧光染料之间的溢漏
03
考虑标记物的表达水平和共表达特征
04
根据荧光染料的亮度选择最优搭配
05
从荧光抗体供应商中选择可用性高的抗体(包括但不限于BD,Biolegend,ThermoFisher,Miltenyi,Novus,R&D Systems,Beckman Coulter,Bio-rad……)
06
根据 OMIPs(Optimized Multicolor Immunofluorescence Panel)选择已得到验证的克隆抗体
案例分享
基于Novocyte 3000流式细胞仪的esaypanel自动设计的小鼠8色方案
参考流式图如下:
我们承认任何计算机算法(包括EasyPanel)都有潜在局限性,因为很难解释不同实验条件、激光强度、PMT以及可能影响方案性能的多种其他因素的复杂性。我们相信,最好的Panel,尤其是复杂的Panel,最终来自EasyPanel的智能和用户自身体验的结合。用户可以通过每个Panel下“”的按钮轻松微调或优化EasyPanel设计的方案。
温馨提示: EasyPanel无法对任何组合的性能提供最终结果保证,因为这还取决于我们无法控制的其他因素,包括克隆选择、产品处理、抗体滴定、样品制备和染色、仪器性能和设置等。
如果各位老师想试用一把,请点击下文阅读原文即可。
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