2023-08-25 19:51:07, 天美色谱 天美仪拓实验室设备(上海)有限公司
前言
2023年7月14日,国际癌症研究机构(IARC)、世界卫生组织(WHO)和粮食及农业组织(FAO)食品添加剂联合专家委员会(JECFA)联合发布了无糖甜味剂阿斯巴甜对健康影响的评估报告。国际癌症研究机构(IARC)援引对人类致癌性的“有限证据”,将阿斯巴甜归为 可能对人类致癌之列(IARC 2B组),食品添加剂联合专家委员会(JECFA)重申,阿斯巴甜每日允许摄入量为40mg/kg。
国际食品法典委员会(CAC)批准阿斯巴甜可用于冷冻饮品、口香糖、糖果、焙烤食品、水产品、调味品、碳酸饮料等,规定最大使用量为0.3g/kg~10.0g/kg。我国通过食品安全国家标准对阿斯巴甜的使用范围、最大使用量等进行严格规范管理。
本文搭配了SCION(赛里安) LC6000 6430超高灵敏度二极管阵列检测器,采用先进的光路设计,结合小体积流通池和单色器可变狭缝,阿斯巴甜和阿力甜检出限可达1.0mg/kg。
实验部分
▶ 仪器
采用包含以下模块的SCION(赛里安)LC6000高效液相色谱仪系统:
▪ 集成六通道真空脱气的SCION LC6100 四元泵
▪ SCION LC6210 高精度、低残留自动进样器
▪ SCION LC6320 立式柱温箱
▪ SCION LC6430 DAD 超高灵敏二极管阵列检测器
▶ 液相色谱条件
▼ 表1 方法参数
试剂及标准品
乙腈溶液(HPLC级)、 阿力甜标准品(编号:BWJ4683-2016)、阿斯巴甜标准品(编号:ASP:841418)
结果
▶ 示例图谱
▲ 图1 阿斯巴甜和阿力甜 25μg/ml示例色谱图
▲ 图2 阿斯巴甜和阿力甜3D紫外吸收全谱图(190nm-230nm)
▶ 标准曲线
将阿斯巴甜和阿力甜混合标准溶液依次稀释为5、10、25、50、100μg/ml,使用外标法进行标准定量,以浓度为横坐标峰面积为纵坐标作外标工作曲线;阿斯巴甜和阿力甜响应值与浓度呈良好的线性关系,所得到的相关系数在0.9999以上,详见图3。
▲ 图3 阿斯巴甜和阿力甜标准曲线
▶ 样品
称取5g的无糖可乐,在50°C水浴上除去二氧化碳,并用水稀释10倍,然后使用0.45μm滤膜进行过滤,从而制备所需的分析无糖可乐,实验结果可见阿斯巴甜分离良好,含量为14.1μg/ml与市面上无糖可乐添加量基本一致,符合CAC食品添加剂相关规定。详见图4。
▲ 图4 无糖可乐阿斯巴甜色谱图
▶ 重现性
阿斯巴甜峰面积RSD%0.71(n=6),保留时间RSD%0.10(n=6);阿力甜标峰面积RSD%0.56(n=6),保留时间RSD%0.14(n=6)结果见表2。
▼ 表2 阿斯巴甜和阿力甜定量定性
▶ 检出限
国家标准 GB 5009.265-2016 阿斯巴甜和阿力甜检出限为1.0mg/kg,实验结果可见SCION LC6430 DAD二极管阵列检测器对阿斯巴甜和阿力甜检出限远优于国家标准GB 5009.265-2016,详见图5。
▲ 图5 阿斯巴甜和阿力甜1.0mg/kg检出限
结论
本应用搭配了SCION LC6000 6430二极管阵列检测器用来快速分析食品中的阿斯巴甜和阿力甜的方法,该方法配置合理、线性良好、灵敏度高,远优于国家标准GB 5009.265-2016食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定方法。
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