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抗体的重链大约55kD，轻链大约25kD，如果你的蛋白也在轻、重链的范围内，浓浓的抗体条带很容易掩盖掉靶蛋白。这是因为靶蛋白与IP抗体一起洗脱，WB的二抗不但识别了靶蛋白一抗，也识别了IP抗体。分析了原因，就可以针对性进行优化了：

Pierce™ 交联法磁珠法 IP/Co-IP 试剂盒

使用试剂盒中单独提供的交联剂，可降低抗体干扰，适合实验优化；不使用交联剂，此试剂盒变身磁珠法经典IP/Co-IP试剂盒，适合实验室新手或者常规实验。

Pierce™ 免疫共沉淀试剂盒

Pierce 免疫共沉淀试剂盒经过优化，使用可直接且永久偶联IP 抗体的 AminoLink Plus 树脂替代蛋白 A/G 琼脂糖微珠，不挑抗体，且减少IP抗体是实验结果的影响。

喜欢DIY，填料不可少。填料的基质是选琼脂糖，磁珠，还是磁性琼脂糖，或者其他材质？目标蛋白是抗体还是重组蛋白，丰度如何？填料的载量如何？能否重复使用？都是 需要提前充分考虑的。

Pierce™ 蛋白 A/G 磁珠

高载量，每mL干填料可结合550~850ug 兔IgG。低特异性，连接重组蛋白Protein A/G，兼具蛋白A和蛋白G的结合位点。

Pierce™ 高载量Ni-IMAC磁珠，EDTA兼容

针对His标签蛋白纯化。Ni-IMAC磁珠拥有高结合能力（每 mL 沉淀微珠含有高达 80 mg 蛋白），可以耐受用于抑制金属蛋白酶并稳定敏感细胞内蛋白的高 EDTA 和还原剂。

细胞裂解提取蛋白作为第一步尤为重要，IP/Co-IP所用的样本质量很大程度受制于裂解液。一个理想的细胞裂解液应达成以下效果：稳定天然蛋白构象、抑制酶活性、最大限度避免结合位点变性、从细胞或组织中最大程度地释放蛋白。

当IP靶蛋白可溶于去垢剂，且抗体可以识别天然蛋白时，采用非变性裂解液，如NP-40或Triton X-100；如需更为剧烈的裂解效果，可选择含离子型去垢剂的变性裂解液，如常见的RIPA缓冲液。

Pierce™ IP 裂解缓冲液

IP 裂解缓冲液是一种基于改良 RIPA 缓冲液配方（不含 SDS）的哺乳动物全细胞裂解试剂。这种中等强度裂解缓冲液可高效溶解细胞蛋白，但不会像一般 RIPA 缓冲液那样释放染色体组 DNA 或破坏蛋白复合物。

Halt™ 蛋白酶和磷酸酶抑制剂单次使用混合物 (100X)

Thermo Scientific™ Halt 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物，可对蛋白样品提供全面的保护。100x浓缩液，24个小包装，适合实验室一起使用，杜绝交叉污染风险。

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