2023-05-25 14:06:35, Gray 上海宸安生物科技有限公司
01
实验概览
“流式样本染色之后可以存放多久?”这是很多老师会问我们的一个问题。
在流式检测中,常会出现因样本规划、运输延迟、机时不足等原因造成已染色的新鲜样本无法及时上机检测的情况,这便要求抗体与样本在结合后有足够的稳定性。在此前的测试中,样本在由宸安生物的CytoATLAS® Antibody流式质谱抗体进行染色后,可于4℃的环境下稳定保存7天。
而本次实验,我们则着重探究对已染色的PBMC样本进行长时间冻存的可行性,在-80℃的条件下将已染色的样本放置90天(3个月)。
02
实验结果
如下图所示,即使经过长达90天的冻存,样本依旧十分稳定,其分群并未因极端温度或长期放置而产生显著变化:
不仅是细胞表面的标志物,胞内的细胞因子(TNFα、IFNγ、Granzyme B)也保持了与第0天极度接近的检测水平:
由此可见,CytoATLAS® Antibody流式质谱抗体及其配套辅助试剂在-80℃长期冻存后仍拥有优异的使用稳定性。这项优势能为流式质谱技术的使用者提供便利,帮助他们应对更多的科研和临床应用场景。
03
实验设计
| 染色:根据实验方案,将抗体试剂加入到外周血全血样本中,室温孵育15分钟
| 红细胞裂解:加入溶血素,涡旋混匀后室温孵育10分钟
| 清洗:室温下离心5分钟,弃上清,再加入细胞染色液重悬样本,室温下离心5分钟,弃上清
| 嵌入剂Ir染色:将Ir-DNA嵌合试剂加入到细胞固定剂中,涡旋混匀后加入到样本中,室温孵育10分钟
| 冻存:将已染色的样本平均分为2份,其中1份进行上机测试,另1份置于-80℃的冰箱冻存90天再取出测试
| 清洗:加入细胞染色液重悬样本,室温下离心5分钟,弃上清,重复2次
| 上样:加入上样溶液重悬样本,室温下离心5分钟,弃上清,再次加入上样溶液,准备上机分析
抗体信息 | |
1 | IgD - 145Nd |
2 | CD27 - 146Nd |
3 | HLA-DR -1 51Eu |
4 | CD8 - 152Sm |
5 | CD45RA - 153Eu |
6 | CD123/IL-3R - 154Sm |
7 | CD19 - 160Gd |
8 | CD14 - 164Dy |
9 | CD66b - 165Ho |
10 | CD197/CCR7 - 167Er |
11 | CD4 - 168Er |
12 | CD45 - 171Yb |
13 | TCRγδ - 174Yb |
14 | CD3 - 209Bi |
15 | Granzyme B - 172Yb |
16 | IFN-γ - 173Yb |
17 | TNFa - 176Yb |
18 | DNA1 – 191Ir |
19 | DNA2 – 193Ir |
20 | Live/Dead – 198Pt |
联系电话:021-50895313
售前咨询:inquiry@polarisbiology.com
官方客服微信:
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