你的分子生物学实验顺利吗?

2023-05-19 13:56:45 默克生命科学


核酸酶来自哪里呢?

核酸酶在实验室中普遍存在,它们通常存在于塑料制品和试剂中,甚至可能来自于科学家或实验人员自身(皮肤、唾液等),而且核酸酶非常稳定。为了不影响实验结果,实验室人员会寻找一些方法来去除它们。

去除实验中的核酸酶的方式有哪些呢?

1

通过高压灭菌抑制RNA酶活性。

2

DEPC使核酸酶失活;DEPC是抑制溶液中RNA酶活性的常用方法,当酶用DEPC处理后,永久失活,但是并未从溶液中除掉。但是DEPC处理方法会对水质产生影响。

3

通过超滤去除酶。

我们做过一个测试,将核糖体RNA加入3种溶液,孵育20分钟,之后用琼脂糖凝胶进行变性条件下的电泳。当使用超滤过滤RNA酶时,rRNA保持完整。同时,使用常规DEPC处理RNase溶液也能防止rRNA降解。作为对比,当RNase溶液未处理,rRNA被降解。结果表明使用超滤去除RNA酶与通过DEPC效果相当。

DEPC     超滤处理      无处理       


DEPC和超滤都可以对核酸酶进行去除。但在效率和安全性上,通过水纯化系统的超滤终端过滤方式(Milli-Q® Biopak)获得无核酸酶水,已经是越来越多实验室选择的方案。

+

Milli-Q® Biopak优点:


提供高纯度无核酸酶水。在挑战试验中得到验证,可去除内毒素(<0.001 EU/mL),RNases(<1pg/mL),DNases(<5pg/mL)和细菌(<0.1 cfu/mL)

代替DEPC等传统手段,提升实验室安全和效率

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