快速掌握免疫（共）沉淀实验奥义，还能省钱！

说起蛋白-蛋白和蛋白-核酸互作实验，多少占点「玄学」，不是 Co-IP 拉不下来蛋白，就是拉下来的蛋白被抗体条带覆盖住了，要么就是跑完EMSA没有看到滞后的条带。

那要怎么快速掌握这些实验，轻松搞定各种疑难杂症呢？

• IP、co-IP、pull-down：都有什么区别，依据具体实验需求如何进行选择？

• IP/co-IP实验流程：IP，co-IP实验的流程是固定的吗？是否可以调整？

• 常用“行话” 要怎么理解？以上示例图证明了EDR1和EDR4有相互作用。如果想要设计好实验，先清楚以下常用“行话”含义：input，output，pre-clear，阳性对照，阴性对照。

• 在进行实验室前，选用试剂时候，需要进行的思考：

1. 抗体----选经过IP验证的抗体，减少假阳性概率

2. 抗体结合蛋白---Protein A, Protein G, Protein A/G, Protein L，到底选哪种？

3. 基质—琼脂糖还是磁珠？

4. 孵育（结合）顺序与孵育条件：抗体，裂解液，beads，如何排列组合？会有怎样的影响？

5. 各种buffer：整个co-IP系统，涉及到裂解液，结合液，洗涤液，洗脱液，这4种溶液要如何考量呢？

• Co-IP背景较深或者条带杂乱

• Input条带清晰，co-IP条带很弱？

• 我的靶蛋白正好和抗体重链分子量接近，要如何减少抗体干扰？

• 靶蛋白没有条带

• 琼脂糖难离心，每次总会吸上来一点儿，怎么办？