MACSQuant® Tyto流式细胞分选仪环球之旅，第五站——丹麦

经历了三年多的疫情，虽然新冠病毒依然存在，但现在，新冠病毒慢慢发展成了一种和人类共生的病毒。疫情爆发三年来，各国科学家积累了丰富的知识和经验，但彻底消灭新冠病毒依然遥遥无期，未来仍需要科学家们继续努力对新冠病毒展开研究，帮助人类早些战胜新冠病毒。

回望新冠病毒爆发之初，全球的科学家们都不约而同地投身到病毒的研究当中，为抗击疫情做出了卓越的贡献。

Mariane H. Schleimann

对，当初这个仪器为我们演示时，实际上我们计划使用它从HIV阳性患者样本中分选CD4+T细胞亚群。当COVID-19爆发，我们将研究方向转向SARS-Cov-2，旨在开发一种基于抗体的新治疗方法。我们计划从COVID-19康复患者身上获取血浆，与病毒一起孵育，并测量中和抗体水平。如果我们发现很好的中和抗体浓度，接着我们会测试他们在2002年的非典型肺炎病毒中和疗效。下一步，我们将尝试从那些可以感染这两种病毒的患者中分离出B细胞。通过这种方式，我们希望能够收获可以用于治疗的抗体。我们还继续使用它与荧光团偶联的刺突蛋白作为诱饵，标记表达和产生SARS-Cov-2特异性抗体的B细胞。

MACSQuant Tyto细胞分选仪非常适合我们，因为可以将其用于分选浆细胞，记忆B细胞或任何目标细胞。关键的一步是从先前感染的病人中分离出B细胞。

没有证据表明病毒依然存在于康复患者的外周血中，但我们不冒任何风险，对待患者样本就像他们依然被感染一样。这意味着任何类型的常规液滴式分选仪都完全不能满足我们的需要。

是的，由于气溶胶的形成，传统液滴式细胞分选必须在生物安全柜或BSL3实验室中进行。然而，我们没有处理感染性样本和产生气溶胶的BSL3实验室设备用于细胞分选仪。由于病毒本身并不集中在患者的血浆中，因此，全封闭的MACSQuant Tyto样本舱可以安全地将COVID-19患者的样本细胞在BSL2甚至BSL1实验室进行细胞分选。

第一步，我们使用MACSQuant Tyto分离抗原特异性B细胞。接下来我们进行单细胞DNA提取，用PCR扩增抗体的基因序列，然后用它来构建和复制我们感兴趣的抗体。然后，这些抗体被用来中和BSL3条件下的病毒。

我们计划从五名患者身上提取材料，他们的血浆可以中和病毒并分离出B细胞，在此基础上，我们计划从每个患者的200个抗原特异性B细胞中产生抗体，我们将在96孔的高通量筛选试验中进一步分析这些抗体。

安全性操作是最优先考虑的，全封闭的细胞分选环境是最主要的优势。此外，使用仪器不需要高强度的培训，一旦全部设置好，实验室人员就可以很容易地使用它。

是的，在大多数基本免疫学和病毒学中，通常在体外或离体细胞被感染的任何地方。人们对被感染的细胞感兴趣。因此使用MACSQuant Tyto细胞分选仪中对我们的病毒感染研究受益匪浅。