简单、快速测试假冒药、仿制药和辉瑞新冠药的飞行时间质谱法

继2022年12月7日国务院联防联控机制公布《关于进一步优化落实新冠肺炎疫情防控措施的通知》之后，国内陆陆续续全面放开。但是，放开并不是说新冠病毒消失了，只是它的毒性减小，而传染性仍然很高。从12月份开始，中国一大波人感染新冠，一时间网上全是“阳阳阳”的消息，年轻人发烧、头痛、拉肚子……，还有不少老年人本身就有基础性疾病，感染新冠后导致去世。这时，降低住院/死亡风险88%的辉瑞新冠特效药—Paxlovid需求激增，价格一度飙升到2万/盒，即使这样依然是“一药难求”。因此，很多国家的药企去争相获取辉瑞仿制药的授权。印度作为仿制药大国,作为“世界药房”必然在辉瑞授权的仿制药生产国中。于是，辉瑞公司治疗新冠病毒肺炎的“神药”—Paxlovid和印度仿版药物成为了最近市面上最紧俏最热门的的药物。

然而即使大家千方百计买到了，但如何鉴定真伪又成了个难题。一般来说，检测药物成分从而鉴定药物的真伪首先会选用液质联用仪（LC-MS），原理是在气态中根据样本质荷比的不同将其分离并进行检测。但LC/MS-MS前端的液相洗脱时间长，一般会有十几分钟到1个小时的持续分析时长，单个样本检测需要的时间较长，这就导致液质的检测通量低，每日的检测样本量有限。

北京东西分析仪器公司生产的飞行时间质谱仪为多功能检测平台，除了从分子水平快速精准鉴定微生物、核酸基因分型法检测致病菌以及检测疾病蛋白标志物外，此款仪器还可用于检测药物小分子。其实对于药物这种成分相对简单的样品来说，飞行时间质谱具有独特的检测技术优势：通量高（一次可上样96个样品）、速度快（单个样本检测仅需10秒左右）、无需复杂的样本前处理。但对于检测小分子（<1000Da）来说，MALDI-TOF存在基质峰干扰，小分子质量校准困难等问题。东西分析质谱应用团队根据市场的需求，近期开发了基于飞行时间质谱平台、专门用于检测药物小分子成分的方法技术，不仅解决了基质峰干扰和小分子校准困难的问题，而且操作非常简单。从样本前处理到上机检测，到最后出结果，仅需数分钟时间。

近日，东西分析运用了此技术对辉瑞新冠特效药奈玛特韦片/利托那韦片（Paxlovid）和印度仿制版药物-Primovir进行了鉴定。

首先对两种药中是否含有抑制新冠病毒在人体内增殖的成分—Nirmatrelvir （奈玛特韦）进行了检测。通过快速、简单的样本前处理， 然后开始点靶、干燥和上机检测。我们在辉瑞新冠特效药中很快就检测到了奈玛特韦的离子峰（m/z=499.54Da），然而在我们所检测的印度仿制药中却未检测到该质量数的离子峰，这一结果说明此药盒中的奈玛特韦片不含Nirmatrelvir这一治疗新冠的关键成分。

图3.飞行时间质谱检测Paxlovid和Primovir中成分—奈玛特韦比对图

随后，我们又检测了两种药中是否含有能够让nirmatrelvir在身体里保持更长时间活性、更好抗击病毒的“守护神”--利托那韦，检测结果显示两种药的利托那韦片中均含有有效成分利托那韦（m/z=720.95Da）。

图4.飞行时间质谱检测Paxlovid和Primovir中成分-利托那韦比对图

此外，在检测辉瑞原研药和印度仿制药的利托那韦片时，我们发现辉瑞原研药利托那韦片需要大概50%左右的激光能量才能将其离子化（激光能量为30%时，依然检测不到离子峰，如图五），而印度仿制药中的利托那韦，仅需15%的常规用激光能量就能很好的电离，所用能量仅是辉瑞药的三分之一。据此，东西分析建立的飞行时间质谱法可以通过调节激发药物电离激光能量的大小，很容易地将同一化合物的不同制剂、即辉瑞原研药和仿制药区分开来。

这一特点在目前的分析方法中尚未见到报道。关于不同制剂对药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄的区别，以及对服药间隔时间的要求，有待药理学家研究。

图5.不同激光能量激发下两种药中利托那韦对比图

北京东西分析仪器有限公司，拥有三十多年的分析仪器研发、制造、服务的历史，系国家高新技术企业、北京市高新技术企业、北京市“专精特新”小巨人企业、北京市“专精特新”中小企业和分析仪器制造行业国际化企业。拥有计量器具资质、医疗器械资质和安标资质等多项资质证书。多次获得BCEIA金奖和行业最具影响力奖。在行业内率先通过ISO9001国际质量体系认证，ISO14001环境管理体系认证。多个产品取得欧盟CE认证，系中华预防医学会卫检专用委员会产品信得过单位。