应用分享 | MaxPeak HPS技术助力非甾体抗炎药分析挑战

2023-02-02 17:23:58, 沃特世 沃特世科技(上海)有限公司



NSAID是一类常用药物非甾体抗炎药的简称,曾经一药难求的布洛芬就属于该类药物。除了镇痛、抗炎和解热功效外,NSAID还可以预防多种严重疾病,包括癌症和心脏病发作等。NSAID的结构和功能具有多样性,但大多数是弱有机酸,进样到色谱系统后,由于理化性质,可能会导致样品损耗、结果差异或峰形不对称等,对检测造成影响。针对这些情况,我们必须开发⼀种可靠的色谱分析方法。下面就跟随小编,看看MaxPeak HPS技术能否克服这些影响,改善NSAID的分析结果,实现更快更准确的检测



检测挑战


NSAID本⾝是⼀种自由基清除剂,是由酸性基团(羧酸、烯醇)和芳香族官能团组成的弱有机酸,当暴露于色谱系统和色谱柱中存在的合金衍生组分时,会表现出分析物与金属离子络合的倾向。NSAID/非特异性金属离⼦复合物的形成可能会显著降低色谱灵敏度,导致色谱回收率较低。这⼀问题有时可通过添加流动相离子对试剂和螯合剂解决,例如添加0.1%三氟乙酸(TFA)以改善色谱峰形,但使用这些试剂会导致系统污染、色谱柱选择性的不可逆变化、高背景干扰,以及紫外(UV)和液相色谱-质谱(LC-MS)应用中的灵敏度较低。

MaxPeak HPS技术旨在通过尽可能减少对金属离⼦敏感的自由基清除化合物的分析物/表面相互作用,提供出色的色谱性能,同时省去使用流动相添加剂或钝化的需求。本研究通过分析丙酸和乙酸衍生物NSAID,比较MaxPeak HPS技术与传统色谱系统的色谱性能。

图1. 本研究使用丙酸和乙酸衍生物结构的NSAID。


材料与方法


  • LC系统1:ACQUITY Arc系统,配备四元溶剂管理器(rQSM)、样品管理器(rFTN)、ACQUITY Arc色谱柱管理器(rCM)、Empower 3色谱软件

  • 色谱柱: XBridge XP, BEH C18, 2.5 μm色谱柱,4.6x150 mm

  • LC系统2:Arc Premier系统,配备四元溶剂管理器(rQSM)、Arc Premier样品管理器(rFTN)、Empower 3色谱软件

  • 色谱柱: XBridge Premier,BEH C18,2.5 μm色谱柱,4.6x150 mm

  • 检测条件: ACQUITY光电二极管阵列检测器(PDA)在215 nm处检测布洛芬和酮洛芬,在265 nm处观察所有其他化合物

  • 柱温: 50 °C

  • 样品温度: 20 °C


结果与讨论


使⽤样品稀释剂分别制备布洛芬、酮洛芬、苯氧苯丙酸、萘普生、双氯芬酸、氟比洛芬和吲哚美辛(Sigma-Aldrich,美国密苏⾥州圣路易斯)的NSAID储备液,浓度约为0.4 mg/mL。为了避免流动相导致钝化的潜在影响,我们采用了新的色谱柱。先后用100%异丙醇HPLC级水彻底冲洗系统。每个系统设置都使用相同的UV检测器以确保连续性。

使用MaxPeak HPS技术时,所有NSAID的色谱峰高和峰面积灵敏度均有所提高(图2、图3、表1、表2)。使用XBridge Premier色谱柱时,峰高响应增加至1.6倍(38%),峰面积响应增加至1.7倍(41%)。当Arc Premier系统XBridge Premier色谱柱搭配使用时,观察到峰高应增加至高达4.7倍(79%),峰面积响应增加至高达4.0倍(75%)

图2. 使用MaxPeak HPS技术增加色谱峰⾯积。

表1. 与传统的ACQUITY Arc系统/XBridge XP色谱柱相比,MaxPeak HPS技术使峰面积增加了数倍。

图3. 使用MaxPeak HPS技术增加色谱峰高。

表2. 与传统的ACQUITY Arc系统/XBridge XP色谱柱相比,MaxPeak HPS技术使峰⾼增加了数倍。

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结论


NSAID是具有镇痛、解热和抗炎作用的药物活性化合物。在NSAID化合物的色谱分析过程中,MaxPeak HPS技术显⽰出显著的峰⾼和峰⾯积响应提升效果。此外,与使⽤传统色谱系统和色谱柱的分析相比,MaxPeak HPS技术使灵敏度有所提升,因此也能提供更出色的NSAID化合物检测限。


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