有关液相和气相的保留时间

保留时间(T)：从进样开始到某个组分的色谱顶点的时间间隔称为该组分的保留时间。即从进样到柱后某组分出现浓度极大时的时间间隔。

调整保留时间（t）：某组分由于溶解（或者吸附）于固定相，比不溶解（或者不吸附）的组分在柱中多停留的时间称为调整保留时间；

调整保留时间=保留时间—死时间；（Vd）。

液相色谱中保留时间的波动与哪些因素有关？

一般而言，与如下因素有关：

1 操作因素；

2 色谱柱的质量；

3 仪器系统，尤其是输液泵的性能。

怎样解决液相色谱保留时间的漂移？

保留时间飘移可能的原因有：

1 柱子没有达到平衡；

解决：平衡更长的时间来解决。

2 实验环境温度发生变化；保留时间和温度有很大的关系，一般温度高，出峰快。

解决：这里的温度不仅指柱温，其实还包括流动相温度。柱温一般都有规定，用柱温箱就可以平衡了，但是流动相温度没有规定，很多人不知道也要保持不变。在空调房里做，保持住室温不变，一般会好很多。

3 流动相比例发生变化；

解决：配置时尽量混合均匀；配置时尽量保证比例没有偏离；使用时尽量保证导管接口处不挥发泄漏；长时间不用的要密封，最好废弃不用。

4 长期使用后柱子损耗；

解决：重新，再生柱子，或更换新的。

也可参考以下文章：

液相保留时间不重现的解决办法

气相色谱仪引起保留时间不重复的最可能原因只有两个:

1.柱温不稳定

2.流速有变化。

有关气相色谱保留时间请查看以下文章：

气相保留时间波动

最后，我们来看下如何锁定保留时间？ 

所谓保留时间锁定，就是使特定化合物的保留时间在不同仪器、不同色谱柱（但标称固定相和相比相同）之间保持不变。为了讨论这一技术的基本原理，要从影响保留时间重现性的因素说起！

化合物的性质、固定液的性质和操作条件；

如果前两个因素不变（对于特定的化合物和GC仪器系统，这当然是成立的）；

只有操作条件会变，即，载气流速、柱温、毛细管柱规格和检测器类型等。

载气控制：

对于同种载气来说，压力和流速是影响保留时间的参数；

不同厂家的压力表和流量计的制造精度有所不同，故当不同仪器的压力和流量显示完全一致时，柱内流量也不尽相同；

现在有了EPC，这一问题基本得到了解决；

虽然同一厂家制造的EPC不可能每项都严格一致，但差异微小，通过压力的自动调节完全可以补偿这一差异。

温度控制：

保留时间对温度极为敏感，过去采用水银温度计测量柱温时，重现性显然有问题。现在都用热敏元件与电子线路来控制温度，精度大为提高。不同仪器间温度重现性令人满意。即使有0.5℃的温度差异，我们仍能通过调节柱前压的办法来使保留时间达到重现。

色谱柱规格：

一、不同厂商的色谱柱，尽管标称规格一致，但难免有内径的不均匀、固定液膜厚的变化、以及柱长的不精确，这些都会造成保留时间的波动。

二、同一根色谱柱在使用过程中会发生变化，比如，重新安装或因柱污染而截去1～2cm后，若其他操作条件不变，保留时间就不能重现了。

目前，同一厂商的色谱柱制造重现性已相当高，而不同厂家的色谱柱尚不能完全重现，尤其是极性柱。但我们如果采用同一厂家的色谱柱，就可基本解决这一问题。至于色谱柱长度的变化，可以通过调节柱前压来补偿。

检测器类型：常规检测器：常压下工作； 

MS：高真空下工作；

AED：高于大气压（如，10kPa）下工作。这样，当比较常规检测器和MS或AED所得结果时，即使柱前压严格一致，柱压降也不同，保留时间就不能重现。采用EPC时，就很容易通过调节压力使柱压降保持相同。

通过上述分析我们可以得出结论，只要仪器的载气和温度控制精度足够高，只要色谱柱标称规格一致，就可以通过调节柱前压的方法来补偿操作参数的微小变化，从而实现保留时间的重现，这就是RTL的基础。