MACSQuant® Tyto® 流式细胞分选仪环球之旅,第三站——英国

2022-10-26 09:25:12, MBCN 德国美天旎生物技术公司


  MACSQuant Tyto 环球之旅    — 英国站


伦敦

大学癌症研究所是一个独立的研究机构,隶属于伦敦大学医学院,来自该研究机构的血液学副教授Rajeev Gupta及其团队,一直致力于癌症生物学的研究,同时,对转化医学高度关注,他们最终目标是希望开发新的癌症治疗方案。然而突如其来的疫情,改变了全世界人民的生活,也改变了Gupta和他团队的研究重点。团队在对患有严重新冠肺炎并伴有肺部并发症的患者血液样本进行显微镜分析期间,他们观察到中性粒细胞和单核细胞具有典型的空泡外观,但这一现象,在症状轻微的新冠阳性患者中没有发现。通过流式细胞术分析这些天然免疫细胞,发现补体受体3(complement receptor 3)高表达,这一惊人的发现促使该团队想对来自轻症和重症COVID-19患者的固有免疫细胞的功能特性做进一步研究,找寻其在新冠的发生过程。为了做到这一点,他们必须从全血中分离出这些细胞。单核细胞和中性粒细胞是细胞中最脆弱的细胞类型,很容易受到压力激活,所以要想获得功能分析所需的有意义、无偏移的数据变得异常复杂。

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基于对传统液滴式流式细胞仪的了解,Gupta和他团队以他们多年的传统流式经验清楚的知道不能用它来分选这些细胞,因为从健康志愿者身上用传统的细胞分选分离出的单核细胞观察到明显的被“激活”,并且细胞对任何刺激都表现出“超反应”。由于传统的细胞分选是使用液滴式分选(droplet cell sorter)完成的,它们的工作方式意味着细胞会首先暴露在巨大的压力下——然后是快速释压、剪切力和电荷,而固有免疫系统的细胞又非常脆弱,所以分选后的细胞活性各不相同,以至于影响了细胞原本的功能特性,所以我们必须找到解决这个问题的方法。传统液滴流式液路为非封闭的系统,对于分选新冠患者样本,让我们担心气溶胶的产生,对实验操作人员,实验室安全问题。基于设备的限制,实验一度停滞。

Gupta

教授说,幸运的是我们很快了解到MACSQuant Tyto,通过沟通知道Tyto的原理,特点后便确定这就是我们需要的流式细胞分选设备。让我们一起来听听Gupta教授怎么评价MACSQuant Tyto。

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Q1·

您最终选择了MACSQuant Tyto 细胞分选仪,它是如何克服这些挑战的?


MACSQuant Tyto的分选过程准确且温和,而且与传统液滴式细胞分选仪不同,它不会损坏我们感兴趣的细胞。Tyto 的独特之处在于它的封闭的分选系统:样品通过一个无菌端口进入进样室,然后所有分选都只在这个封闭的分选舱内进行。该细胞分选仪使用经滤过的空气所产生的低压引导单细胞通过一个微流体通道,并通过微芯片控制的阀门将目标细胞分选进相应的收集室。Tyto 的分选过程是一个令人难以置信的温和过程,它使我们的目标细胞不受伤害并不被激活,这不仅可以帮助我们准确了解这些细胞,而且有利于在下游应用中得到更可靠的结果—这对我们的工作非常重要。

     

Q2· 

在选择Tyto之前,您还考虑过哪些其他选择?


从2019年开始,我看到了有关Tyto的各种信息,因此我了解它的存在和功能。新冠的流行引发了我们思想上的巨大变化:我们不知道病毒的传染性有多强,因此我们迫切需要一种在封闭系统中分离细胞的方法。这也让我们重新审视了Tyto:仪器本身没有任何流体和管道系统,分选舱是一次性实验耗材,因此没有残留污染的风险。更重要的是,分选过程没有气溶胶形成,因此即使在BSL-1或2的实验室条件下,对实验人员也是完全安全的

     

MACSQuant Tyto 工作原理

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