2022-10-15 18:46:48 大连依利特分析仪器有限公司
ELITE HPLC
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问
老师您好,实验室中有一根正相氨基柱,可以来做糖吗?
答
可以的。正相氨基柱和用来做糖的Hilic氨基柱填料是一样的,溶剂过渡的时候需要注意溶剂替换顺序:按正相溶剂——异丙醇——甲醇——乙腈水这个顺序依次过渡。偶尔这么过渡一两次是没有问题,不过我们不建议氨基柱经常正相、亲水模式来回替换,这样会影响氨基柱的柱寿命。
问
色谱柱如何自己填充?
答
通常是称一定量的填料,用溶剂充分匀浆,然后加压打入柱管。装柱操作需要丰富的经验,需要老师们一点点尝试,一点点摸索。
问
色谱柱如何清洗?
答
用该模式下强洗脱流动相充分冲洗。比如C18色谱柱通常用高比例有机溶剂洗脱,硅胶柱通常用正己烷洗脱。
问
为什么柱子基线很难冲平?
答
一般情况下基线是很容易冲平的。如果基线不容易冲平,可能是色谱柱填料被污染了,需要换更强洗脱能力的溶剂,充分冲洗一段时间,再换上分析用的流动相平衡。
问
拖尾峰,分叉,是不是色谱柱原因呢?
答
很多原因可能引起峰拖尾和分叉。如果我们分析检测的所有峰都拖尾或者都分叉有可能是色谱柱的原因,即有可能是色谱柱损坏,我们可以用色谱柱测试标准方法测试一下色谱柱,判断是不是色谱柱损坏。
问
氨基柱怎么保存和清洗?
答
正相模式的氨基柱可以用正己烷清洗和保存;亲水模式氨基柱即做糖类样品的氨基柱可以用70%乙腈水清洗和保存。
问
柱子堵了,压力大怎么清洗?
答
反相模式下,若是高盐引起的色谱柱压力大,需要用10%甲醇水低流速冲洗色谱柱,直至压力降低。若是样品堵塞色谱柱柱头引起的色谱柱压力大,则需反接色谱柱,断开检测器,用低流速的纯甲醇缓慢冲洗。
问
春蕾霉素用什么柱?
答
不知道您使用的具体的色谱条件?有篇文献用的是常见的色谱条件,用我们Supersil ODS2。具体实验细节您可以跟我们400客服联系。
问
基线噪声很大怎么解决?换了色谱柱和流动相了还不行?
答
噪声大有很多原因引起,若是换了色谱柱和流动相都不能解决,有可能是仪器的问题。建议老师先看一下氘灯的使用时间,有可能是灯能量太低了,也有可能是检测池污染了等等。
问
请问实验间隔一段时间后样品的峰图重现性差可能是什么原因?柱子正常维护也经过长时间的冲洗?
答
日间重复性差可能与温度变化、流动相挥发等有关,这个需要具体看实验方法和样品等相关信息,您可以直接与我们400客服联系。
问
需要每次做完实验都冲洗吗?
答
我们建议每次做完实验都清洗色谱柱。
问
高盐的柱子需要怎么平衡以及怎么冲洗柱子?
答
若您的仪器和色谱柱有机相比例较低,则可以直接用高盐流动相平衡。实验结束后,需先用高比例水相冲洗高盐,再用建议流动相冲洗和保存色谱柱。
问
口服溶液中羟丙甲纤维素含量测定有推荐的柱子或方案吗?
答
可以用我们的Amber SEC 300这款色谱柱分析检测羟丙甲纤维素样品,具体实验细节可以跟我们400客服联系。
问
我们主要做中药,请问一下复杂的样品选哪款C18?
答
复杂样品建议选用SinoPak C18,这款色谱柱碳含量是21%,可以使疏水性样品保留的时间更长,复杂样品中的各峰会分离的更好。
问
做SEC时样品峰形不好,咋回事?
答
应该是样品有一定的疏水性,可以添加10%乙腈或者200mM NaCl等屏蔽一下疏水性。或者直接用我们的Amber SEC plus色谱柱。
问
主做头孢类,呋辛钠使用哪款柱子?
答
分析高聚物可以用G-10,分析含量可以用Supersil ODS2。
问
柱子的压力特高是堵了吗?
答
首先排除仪器和流动相引起的压力变化,如流动相粘度较大引起的压力过高,仪器管路堵塞引起的压力过高等。单纯就色谱柱来讲,同一根柱子压力突然升高,应该是柱子堵了。
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