“酶标仪刺客”退！退！退！

这个夏天雪糕“刺客”真的太猖狂了！

没错！就连有的实验室选购酶标仪也同样遇到了“刺客”！

     那怎么才能避免这些“刺客”呢？     

根据自己的需求选购，才能让“刺客”退！退！退！

当荧光分子受平面偏振光激发时，如果分子在受激发态时期保持静止，发射光将位于同样的偏振平面。如果在受激发时期，分子旋转或反转偏离这一平面，发射光将位于与激发光不同的偏振面。如果用垂直的偏振光激发荧光素，可以在垂直的和水平的偏振平面检测发射光强度。如果分子很大，激发时发生的运动极小，发射光偏振程度较高。如果分子小，分子旋转或翻转速度快，发射光相对于激发光平面将去偏振化。该技术可应用于分子-分子、蛋白-DNA、蛋白-蛋白之间相互作用以及药物和SNPs的筛选等研究。

时间分辨荧光（TRF, Time-resolved Fluorescence）中所使用的示踪剂为镧系离子，与传统荧光标记物相比，镧系离子的标记物具有斯托克斯位移大、荧光寿命长（荧光寿命延长至ms级）、荧光发射峰窄等特点，需要在经过优化的延迟时间后，对标记物的荧光强度进行测量，有利于降低本底、提高分析灵敏度。该技术多应用于内分泌科检查（Ultra TSH，T3，T4，Insulin等）、妇产科检查（FSH，LH等）等临床诊断。

荧光共振能量转移（FRET，Fluorescence Resonance Energy Transfer）是指两个荧光发色基因在足够靠近时，当供体分子吸收光子后被激发到更高的电子能态，将供体激发态能量转移到受体激发态，使受体可以发射更强于本身的特征荧光，也可以不发荧光。该技术可以应用于酶活性分析、蛋白质-核酸相互作用、离子通道研究以及钙流检测等。

时间分辨-荧光共振能量转移（TR-FRET，Time-Resolved Fluorescence Energy Transfer）是将FRET的供体替换为镧系元素作为荧光标记。由于供体的激发态寿命很长，背景荧光（自发荧光）的激发态寿命很短，标记物和背景很容易就能区分开，能量转移亦能通过时间分辨（延迟时间）以及光谱分辨（滤波器）与受体的荧光区别开来。

利用作为供体和受体的微珠来检测生物分子的相互作用，当分子存在相互作用时，供体和受体的微珠距离拉近，从而激发化学反应，产生荧光信号。互相接近的两微珠距离可允许200nm，远大于FRET和FP，因此可用于检测大分子之间的相互作用，如：蛋白质。