2022-07-31 10:01:36 北京东西分析仪器有限公司
前言
维生素A又名视黄醇,属于脂溶性维生素,维生素A对于婴幼儿的骨骼和视力的生长发育有很大的作用,同时其还具有维持正常的视觉功能防止夜盲症、促进机体正常生长发育、增强机体的造血功能和预防癌症等作用。维生素E又名生育酚,具有抗不育功能和抗氧化作用,在生命过程中起着重要的作用。维生素A与E是重要营养添加剂,建立维生素A和E的检测方法对监测其含量意义重大。
目前测定乳制品中维生素A和E的方法有紫外分光光度法、薄层层析法、荧光法、气相色谱法和高效液相色谱法等。本文根据GB5009.82-2016《食品中维生素A、D、E的测定》,建立了快速测定乳制品中维生素A和E的含量的方法,供相关人员参考。
LC-5520液相色谱仪
PART ONE
实验部分
实验原理
试样中的维生素A及维生素E经皂化(含淀粉酶先用淀粉酶酶解)、提取、净化、浓缩后,反相液相色谱柱分离,紫外检测器或荧光检测器检测,外标法定量。
仪器与试剂
LC-5520 液相色谱仪(紫外检测器);
AS-405 自动进样器;
DM-101 在线脱气机;
无水乙醇(不含醛类物质);
L-抗坏血酸;
氢氧化钾;
石油醚;
无水硫酸钠;
甲醇;
维生素A标准品;
维生素E标准品。
实验条件
色谱柱:C18柱,250 mm×4.6 mm,5 μm;
流动相:甲醇;
流 速:1.0 mL/min;
柱温:35 ℃;
检测波长:维生素A:325nm 维生素E:294nm;
进样量:20 μL。
样品处理
称取试样约10 g(精确到0.1 mg)于250 mL三角瓶中,用50 mL 温水水使其溶解。然后加入约 100 mL 抗坏血酸的乙醇溶液,充分混匀加25 mL 氢氧化钾水,于55℃下搅拌皂化约 45 min,石油醚萃取,无水硫酸钠干燥,滤液在 40 ℃±2 ℃充氮条件下蒸至近干。用石油醚定容至10ml。准确移取2.0 mL ,置于 40 ℃±2 ℃的氮吹仪中,吹干。加 5.0 mL 甲醇,振荡溶解残渣,离心静置至室温后待测。
PART TWO
实验结果
将不同浓度的维生素A和维生素E混合标准溶液依次注入液相色谱仪中分析,分别以维生素A和维生素E峰面积为纵坐标,维生素A和维生素E浓度为横坐标绘制标准曲线。并将处理后的样品注入液相色谱仪,在标准曲线读取测试结果,并计算维生素A和维生素E含量。下图为样品中维生素A和维生素E的谱图。
图1 奶粉样品中维生素A、E谱图
PART THREE
实验总结
液相色谱法是测定脂溶性维生素A、E的常用方法,本文根据GB5009.82-2016《食品中维生素A、D、E的测定》,建立了快速测定乳制品中维生素A和E的含量的方法,经实验验证,该方法结果准确、可靠,可供相关人员参考。在本实验过程中,旋转蒸发时的氮气保护和皂化反应是测定中的关键影响因素,需要注意皂化的温度和时间,以保证皂化反应的的完全进行。
关于我们
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