2022-07-15 02:10:14, 天美色谱 天美仪拓实验室设备(上海)有限公司
“
点击蓝字 关注我们
“氨基酸(aminoacids)是组成蛋白质的基本单位”,在人的生命活动中不可或缺。
氨基酸分析仪,是用于测定蛋白质、肽及其他药物制剂的氨基酸组成或含量的仪器。进行氨基酸分析前,必须将蛋白质及肽水解成单个氨基酸。它是基于阳离子交换柱分离、柱后茚三酮衍生、光度法测定的离子交换色谱仪。有的样品中氨基酸以游离态存在,而有的样品中氨基酸以蛋白或多肽形式存在,当然,大多数样品氨基酸以两种形式同时存在。根据关注点不同,我们常常把样品分为水解样品和游离样品。
# 水解样品(蛋白质及多肽) #
图 | 水解样品(蛋白质及多肽)
1 15种常规氨基酸(常规酸水解)
2 含硫氨基酸氨基酸(氧化水解)
氧化水解含硫氨基酸需先用过甲酸将胱氨酸、半胱氨酸氧化为磺基丙氨酸,将蛋氨酸氧化为蛋氨酸砜,此两种物质在酸水解过程中稳定且与其它氨基酸易分离,然后再将蛋白进行酸水解,进行测定。在氧化水解处理过程中,除色氨酸不能测定外,某些芳香氨基酸也可以部分氧化、破坏,而不能测准,因为在HBr作为氧化中止剂时,酪氨酸、苯丙氨酸和组氨酸均会被部分氧化而不能测定,如果用偏重亚硫酸钠为中止剂时,酪氨酸不能测定。
3 色氨酸(碱水解)
碱水解相对于酸水解而言,碱水解时破坏的氨基酸要多很多,但酸水解会被破坏的色氨酸在碱水解时却能保持稳定,因此碱水解就是用以分离色氨酸。通常会使用氢氧化钡,这样水解之后就必须用CO32-或SO42-来沉淀钡离子。而且氨基酸可能会因为沉淀盐的吸附而损失。亮氨酸在碱水解和酸水解过程中都很稳定,它可以用来检查这种吸附产生的损失。
# 游离样品(游离氨基酸) #
图 | 游离样品(游离氨基酸)
游离氨基酸游离样品关注的是样品中的以游离态存在的氨基酸,需要考虑的是提取和除杂质。
1 提取
提取主要针对的是动物组织,植物组织,以及其他含游离氨基酸的固体样品,这类样品需要把氨基酸从固体中提取出来;如果样品中含有牛磺酸,而且用钠系统分析,则应采用A液作为稀释液,用样品稀释液或者水稀释会有轻微干扰,对牛磺酸含量较小的分析会有影响。
2 去除杂质
去除杂质主要是去除样品中可能含有的蛋白质,重金属以及其他干扰物质。金属离子用EDTA去除,蛋白沉淀剂应用较多的有苦味酸、磺基水杨酸(SAA)、三氯乙酸、乙醇等。当样品中含有较多3-6肽(分子量500-1000)时,可用约0.5%磷钼酸进行沉淀,但最终上机时的磷钼酸浓度应小于0.1%(1mg/mL),脂肪含量高的样品需脱脂(索氏提取)。
结论
本文介绍了经过Scion Artemis 6000实验验证过的含氨基酸样品前处理方法,符合GB/T18246&GB5009.124等相关标准
04-26 赛默飞生命科学
【反射颜色测量】典型配置、硬件说明、软件操作04-26
【文末福利】东北人做实验,爆笑来袭!小嘴儿叭叭的~04-25 黑龙江办事处
直播预告 | 大规模设备更新-赛默飞生命科学专场直播04-25 赛默飞生命科学
【转载】「最佳的抗皱塑形运动方案」研究表明:这两类运动可有效延缓皮肤衰老,特别是对于女性!04-25 生物谷
【有奖征集】「寻找实验室最美身影」主题摄影大赛火热征稿中04-25
让你的干细胞研究“研”值飙升的秘密04-25 赛默飞生命科学
CIBF2024|H.E.L诚邀新老朋友莅临指导04-25 Don Lin
苏州佳谱科技有限公司参与制定国家标准,助力水泥窑固体废物处理技术规范发展04-25
DW行业解决方案|食品安全微生物实验室能力建设04-24 DW
全国排名公布!色谱大赛战况激烈,高手如云!04-24 市场宣传部
在众多可能中,找到你的“那一个”04-24 赛默飞生命科学
融合创新,质领未来—钢研纳克蝉联检测及科学仪器行业重磅奖项04-24 钢研纳克
4月24日直播 | 使用安捷伦Seahorse技术快速精准检测线粒体毒性04-24 安捷伦细胞分析
Nature 子刊|陆军军医大肿瘤微环境新成果,一作分享研究思路04-24 转载自生物学霸
4月25日直播 | 中国PIC/S成员资格对监管实验室的影响与含义04-24 安捷伦细胞分析
它来了,符合国家卫生行业标准的流式细胞仪性能校准服务!04-24 安捷伦科技
剑桥大学/阿斯利康利用RTCA揭示cGAS-STING 该明星分子在神经小胶质细胞炎症中的机制04-24 安捷伦细胞分析
4月26日直播 | 类器官研究大讲堂 开启精准医学新时代04-24 安捷伦细胞分析
追忆星空回响,坚守使命信念——中科科仪与“东方红一号”的峥嵘岁月04-24