【应用分享】ASPE480免疫亲和固相萃取系统助力国标GB 31658.17-2021进行多兽残检测

主要仪器设备：

美正生物ASPE480免疫亲和固相萃取系统、PerkinElmer QSight液相色谱串联质谱仪。

试剂材料：

甲醇、乙腈、乙酸乙酯、甲酸为色谱纯；

乙二胺四乙酸二钠·二水、柠檬酸·一水、磷酸氢二钠·十二水、磷酸二氢钠·二水、浓氨水、氢氧化钠为分析纯；

甲醇中32种磺胺类/喹诺酮类化合物混标，P/N：MSVL0415-100M；

四环素类混合标准品，P/N：MSVL0399-100M。

0.05 mol/L磷酸二氢钠溶液：取磷酸二氢钠·二水7.8 g，用水溶解并稀释至1000 mL。

0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液：取磷酸氢二钠·十二水17.9 g，用水溶解并稀释至1000 mL。

磷酸盐缓冲液：取0.05 mol/L磷酸二氢钠溶液190 mL，用0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液稀释至1000 mL。

1 mol/L氢氧化钠溶液：取氢氧化钠4 g，用水溶解并稀释至100 mL。

Mcllvaine-Na₂EDTA缓冲溶液：取柠檬酸·一水12.9 g、磷酸氢二钠·十二水10.9 g、乙二胺四乙酸二钠·二水39.2 g，加水900 mL，用1 mol/L氢氧化钠溶液调pH至5.0 ± 0.2，用水稀释至1000 mL。

20%甲醇溶液：取甲醇20 mL，加水80 mL，混匀。

洗脱液：取甲醇150 mL，加乙酸乙酯150 mL、浓氨水6 mL，混匀。

复溶液：取水40 mL，加甲醇5 mL、乙腈5 mL、甲酸0.05 mL，混匀。

PolyPlus HLB-2小柱：200 mg/6 mL，P/N：CSS0147。

样品提取

称取试样2 g，加Mcllvaine-Na2EDTA缓冲液16 mL，涡旋1 min，超声20 min，－2℃、10000 r/min离心5 min，收集上清液。残渣中加磷酸盐缓冲液16 mL，重复提取1次，合并2次提取液，混匀，－2℃、10000 r/min离心5 min，玻璃纤维滤纸过滤，取25mL滤液，备用。

样品净化

在ASPE480仪器上，编辑运行方法进行固相萃取小柱的净化；收集洗脱液，45℃水浴氮气缓慢吹干。具体方法如下：

ASPE480仪器净化方法

基质混合标准工作溶液配制

取高浓度兽药混合标准溶液，用空白样品基质溶液稀释成50 ng/mL的基质混合标准工作溶液。