2022-04-27 17:58:55, 古锦敏 上海吉凯基因医学科技股份有限公司
2022年3月9日,中山大学附属第一医院神经科邢世会和曾进胜教授研究团队在自噬与卒中远隔部位血管新生的研究中取得重要进展。相关研究成果再次发表在生物学一区期刊《Autophagy》(最新影响因子16.02;5年影响因子16.58),文章题目为“RTN4/Nogo-A-S1PR2 negatively regulates angiogenesis and secondary neural repair through enhancing vascular autophagy in the thalamus after cerebral cortical infarction”。该研究首次阐明Nogo-A通过调节血管自噬活动影响脑梗死后远隔部位血管新生的分子机制,为卒中后远隔损害的防治和改善神经功能提供了新的视角。
研究人员发现局灶性皮质梗死后,同侧丘脑神经元和少突胶质细胞Nogo-A上调并激活其血管上Δ20受体S1PR2通路。运用基因沉默技术阻断Nogo-A/S1PR2信号通路能够显著抑制丘脑血管内皮细胞自噬激活,促进血管新生;反之,激活该信号通路促进梗死同侧丘脑血管自噬激活,抑制血管新生。
研究进一步证实Nogo-A/S1PR2通过促进自噬启动和抑制自噬体降解调控血管自噬流水平。S1PR2受体通路激活后,其下游分子ROCK1与自噬调节蛋白Beclin1相互结合,促进Beclin1磷酸化,从而调节血管自噬活动。阻断Nogo-A/S1PR2通路促进血管新生能有效保护脑梗死同侧丘脑继发性神经损害,改善大鼠的学习和记忆功能。
图(左):Nogo-A/S1PR2信号通路诱导脑梗死远隔部位血管自噬抑制血管新生作用机制示意图;(中):体外实验证实Nogo-A/S1PR2信号通路调控血管内皮细胞自噬流(Control组、Nogo-A-Δ20组、Nogo-A-Δ20+BafA1组、Nogo-A-Δ20+3-MA组、Nogo-A-Δ20+JTE013组);(右):Nogo-A/S1PR2信号通路调节血管自噬的分子机制及其对脑梗死后远隔部位血管新生和神经修复作用(Scramble-SiRNA组、Nogo-A-SiRNA组、IgG-Fc组、Nogo-A-Δ20-Fc组)。
吉凯助力
该研究中使用的大鼠Rtn4 (Genbank,NM_031831)干扰慢病毒(GV248载体,靶点GTGATCCAGGCTATCCAGAAA)由吉凯基因提供,助力高效率特异性的基因沉默。
病毒滴度:1.5×109 TU/ml
注射部位:右侧丘脑,脑立体定位注射
注射参数:使用15μl注射器,注射4个位点,3 μl/位点,注射速率0.5μl/min
检测时间:14天
作者简介
中山大学附属第一医院神经科邢世会教授和曾进胜教授为该论文共同通讯作者,肖佩仪和古锦敏为共同第一作者。该研究获得国家重点研发计划和国家自然科学基金等资助。
本文使用了吉凯基因的慢病毒成功实现了体内目的基因的高效沉默。
在神经系统中,慢病毒、腺相关病毒作为高效、安全的基因递送载体,常用于体内目的基因的过表达、干扰、敲除等。
那么神经系统如何选择根据实验目的选择合适的工具病毒,在实际操作中如何应用呢?
明天的直播课将特邀Nature子刊一作——南京大学刘新峰教授团队成员万婷博士亲临吉凯基因直播间,为您带来一场干货满满的技术应用案例分享。
免费课程——【组织特异性基因调控】
在神经领域如何应用
直播时间
The Live time
”
4月28日(周四) 15:30—16:30
直播报名
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课程内容
The Course content
”
报告一【15:30-16:00】:Nature Communications 最新成果解读——LCN2调控急性缺血性脑卒中后继发性白质损伤的特异性分子机制
1. LCN2参与的星形胶质细胞吞噬活化促进继发性脑白质损伤
2. LCN2介导星形胶质细胞吞噬作用的分子机制
报告二【16:00-16:30】:神经领域基于工具病毒的组织特异性调控策略
1. 常用工具病毒比较及选择:慢病毒、AAV、腺病毒
2. 组织特异性调控策略:常见基因调控方式、组织特异性血清型/启动子、cre-loxp系统
3. 神经领域病毒注射方式及常见问题解析
1.实验技术干货
2.蛋白质组学研究
3.腺病毒简介及应用
6.单细胞测序
8.悬浮细胞专用病毒
10.测序技术研究与应用
12.腺相关病毒选择/应用
13.表观遗传研究
14.文章解析
15.国自然课题设计思路解析
16.生物信息分析及工具
17.外泌体研究
18.肿瘤免疫研究
19.高分文章
20.吉凯病毒神经方向应用案例
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