解决方案 | 全自动固相萃取-LC-MS/MS测定生活饮用水及水源水中35种抗生素

2022-03-27 17:46:18 北京莱伯泰科仪器股份有限公司

前言

近年来，抗生素废水的排放加重了水体严重污染，水体抗生素污染成为社会亟待解决的问题。抗生素类具有极强的水溶性且化学结构稳定，容易在水环境中蓄积。目前，地表水、地下水、饮用水、土壤及污水处理厂出水多次被检测到抗生素残留。

抗生素滥用导致了环境中的抗生素、抗药性细菌、抗药性基因的增多，对人和动物体造成危害，抗生素残留污染水环境及影响人体健康问题已成为近些年社会关注的热点。

本实验参考DB22/T 2838-2017《生活饮用水及水源水中10种抗生素的检验方法超高效液相色谱-质谱/质谱法》，利用莱伯泰科SPE 1000全自动固相萃取系统进行富集，MultiVap-10定量平行浓缩仪进行浓缩，采用LC-MS/MS检测样品，建立了一套检测水中多种抗生素的实验方案，此方案的回收率及平行性良好，适合水中多种抗生素的检测。

本方法的优势：

1、SPE 1000 全自动固相萃取系统可实现最多八个样品同时上样，萃取大体积水质样品时能实现喷淋进行清洗样品瓶操作，较少目标物粘壁，提高回收率，确保实验结果准确、可重复、无上样管路交叉污染；

2、MultiVap-10定量平行浓缩仪可实现自动定量，节省人力，提高实验效率，且空白测定结果中没有目标物的检出，可以确认前处理过程中不会产生系统污染和交叉污染；

3、本实验中采用的固相萃取、浓缩方法简便、快速，适用于水中多种抗生素的检测分析。

SPE 1000 全自动固相萃取系统

MultiVap-10定量平行浓缩仪

一、实验过程

（一）、仪器与试剂

SPE 1000 全自动固相萃取系统，莱伯泰科公司；

MultiVap-10定量平行浓缩仪，莱伯泰科公司；

液质联用仪：SCIEX Exion LC™液相系统+ Triple Quad™ 4500质谱系统，SCIEX公司；

21种磺胺类抗生素标准使用液：10μg/mL，溶剂体系为乙腈∶0.1%甲酸水=1∶4；

12种喹诺酮类抗生素标准使用液：10μg/mL，溶剂体系为乙腈∶0.1%甲酸水=1∶4；

四环素标准使用液：10μg/mL，溶剂体系为甲醇；

土霉素标准使用液：10μg/mL，溶剂体系为甲醇；

甲醇（色谱纯，Fisher 公司）；

甲酸（色谱纯，阿拉丁）；

Na2EDTA（99%，百灵威）；

HLB固相萃取柱：500mg/6mL，莱伯泰科公司。

（二）、实验过程

1、标曲配制

在标准确定的实验条件下，配制一系列混合抗生素标准使用液，用乙腈∶0.1%甲酸水=1∶4配制浓度分别为0、10、20、50、100、200、500ng/mL，供液相色谱-质谱/质谱测定，得到标准工作曲线。

2、固相萃取样品测定

量取1000mL水样，加入0.5g Na2EDTA，充分溶解后经0.45μm滤膜过滤，然后按图1 的方法进行固相萃取富集，收集液置于M10中35℃浓缩至近干，然后用甲醇∶0.1%甲酸水溶液定容至1mL，待测。

图1固相萃取方法流程

3、加标回收率测定

按照前述的方法准备样品，在样品中加入一定体积的35种抗生素标准使用液，加标浓度为200ng/L，最后得到加标样品待上机检测。

（三）、LC-MS/MS测定条件

a）色谱柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；

b）柱温：40℃；

c）进样量：5μL；

d）流动相：A:0.1%甲酸水溶液，B: 甲醇（梯度洗脱程序见表1）；

e）流速：0.40mL/min；

f）离子源参数：

IS电压：5500V；气帘气CUR: 30 psi；雾化气GS1: 50 psi ；

辅助气GS2: 60 psi；离子源温度TEM: 600 ℃ ；碰撞气CAD: 9 psi；

g）检测方式：正离子模式，多反应监测（MRM）。

二、测定结果

（一）、35种抗生素色谱图

图2 35种抗生素色谱图

图3 自来水样品谱图

图4 样品加标色谱图

（二）、35种抗生素线性

35种抗生素校准曲线线性良好，R2在0.995-0.9999之间，具体见表3。

表3 35种抗生素线性数据

（三）、加标回收率

通过固相萃取富集、浓缩进行水中35种抗生素的加标测试，经LC-MS/MS分析得到加标回收率结果在71.3%-103.2%之间，RSD在1.4%-10.7%之间。

三、结果与讨论

本方法采用莱伯泰科SPE 1000全自动固相萃取系统和MultiVap-10定量平行浓缩仪进行水中35种抗生素的富集和浓缩实验，通过LC-MS/MS进行检测，方法快速、简单、自动化程度高、结果可靠。

参考文献：DB22/T 2838-2017《生活饮用水及水源水中10种抗生素的检验方法超高效液相色谱-质谱/质谱法》

关于莱伯泰科

北京莱伯泰科仪器股份有限公司（股票代码：688056.SH）成立于2002年，是一家专业从事实验分析仪器的研发、生产和销售的科技型公司。公司自成立之初便专注于科学仪器设备的研发，立志为环境检测、食品安全、医疗卫生、疾病控制、材料研究等众多基础科学及行业应用提供实用可靠的实验室设备和整体解决方案。公司发展至今已拥有各类专利及软件著作权100余项，持续通过高新技术企业认证，连续多年被业内媒体评为中国仪器仪表行业“最具影响力企业”，是全球范围内能将多种类和多功能的样品前处理技术与全自动实验分析检测平台组合成全自动实验分析仪器系统的主要实验分析仪器供应商之一。

公司拥有LabTech、CDS、Empore等行业知名品牌，在中国和美国设有研发和生产基地，并在中国内地主要城市、中国香港、美国马萨诸塞州和宾夕法尼亚州等地设有产品营销和服务中心。公司产品服务涵盖实验室分析仪器、样品前处理仪器、实验室设备、医疗设备、实验室耗材和实验室工程建设等，可为全球多种类型用户提供从实验室建设到样品分析的一站式解决方案。目前，公司产品已销往全球90多个国家，累计服务客户3万余家。

如需了解莱伯泰科的详细信息，请访问http://www.labtechgroup.com/。