2022-02-19 11:51:23, 马书荣 赛默飞材料表征仪器
第五期
细菌检测与分析
作为微生物中一个重要的研究领域,细菌,与我们的健康和生活密切相关,其菌种类繁多,体积微小,结构不同。在环境领域、食品领域、临床医学等,经常需要对细菌种类、细菌数量、细菌中活性物质、细菌作为媒介合成化合物、单个活性菌体等进行快速检测和分析。
与常规检测技术相比,显微拉曼光谱是一种快速、无损、无惧水、微区分辨、非接触式检测的分子光谱技术,非常适合用于微生物的检测和分析,成像功能还可以实现细菌微区成分分布的分析。
仪器和软件
Thermo Scientific™ DXR™3xi 显微拉曼成像光谱仪
Thermo Scientific™ DXR™3显微拉曼光谱仪
Thermo Scientific ™ DXR™ 3系列显微拉曼技术在微生物检测和分析领域具有独特的技术和应用优势:
先进的自动化和智能化光学控制系统
超高的检测灵敏度和空间分辨率
软件控制、实时到样品的激光功率精细调节专利技术
“一键式”操作,无需专业背景
功能强大、界面友好的分析软件
集成数学模型算法、向导操作的TQ Analyst建模软件
光镊-微流控联用技术实现流体中微生物的快速分析
应用案例
细菌结构分析
细菌种类不同,其活性物质如氨基酸、蛋白质等表现出结构和量的差异,拉曼光谱的特征结构峰可以很好的体现活性物质和含量的差异,根据这些差异可以快速无损的进行细菌种类的鉴别和分析。
肠炎沙门氏菌、单增李斯特菌及大肠杆菌DH5α
的拉曼光谱及峰结构归属
单个细菌检测
通常细菌的体积较小,信号较弱,溶液中细菌浓度较低时,很难检测到有效的化学结构信息,尤其是需要对单个细菌的化学结构进行检测和分析。在进行分子结构分析时,需要高灵敏度和高空间分辨率的拉曼技术。
采用超高灵敏和高空间分辨的DXRxi显微拉曼成像光谱仪,利用研究者[1]合成的磁性富集高活性SERS传感器,通过适配子识别细菌,实现低浓度和单个金黄色葡萄球菌的检测和分析。
不同细菌浓度的SERS光谱及定量曲线
SERS传感器包覆的单个细菌:SEM图(a),拉曼白光图像(b),拉曼成像(c),对应拉曼成像区域的拉曼光谱(d)
单个细菌体内合成物的鉴别与分析
酵母菌是一些单细胞真菌,其结构与高等植物的细胞一样,比较复杂,体积小的约2-6um,大的约5-30um。在一定合适的培养条件下,酵母菌菌体可以作为微型“反应器”,在体内合成一些目标化合物,在分析目标化合物时,需要高空间分辨率的显微拉曼光谱仪才能实现在菌体微区的分析,同时要求快速测试以保持细菌的活性。而赛默飞的DXR3xi拉曼成像光谱仪因其超高灵敏度、高空间分辨率和超快速成像功能,是一款非常适合用于这些领域的研究。
细菌空白组和实验组(体内内有合成物,红色光谱)的拉曼光谱:目标物质特征峰202和408cm-1
不同物质在细菌内的特征峰分布:
细菌空白组和实验组(样品来自某高校)
Thermo Scientific ™DXR™系列显微拉曼光谱仪,通过蛋白质、氨基酸等生物活性物质的拉曼光谱特征性,可以轻松实现几微米甚至几百纳米大小细菌种类的检测与分析。利用超高灵敏度和超高空间分辨的DXR3xi成像技术有助于快速研究单个活性细菌体内物质的分布,实现微生物的活体分析。为微生物的研究提供了一种无损、快速、无惧水的研究工具。
参考文献
1,Junfeng Wang et al, ACS Appl. Mater. Interfaces 2015, 7, 20919−20929
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