大体系·高灵敏 | 不再为环境样本容量大、病原检出率低而烦恼

2021-08-13 01:08:40 西安天隆科技有限公司

2018年8月，非洲猪瘟疫情在我国大规模爆发，至今已流行近3年。根据各地监测数据，我国目前已出现非洲猪瘟变异毒株，包括基因缺失株、自然变异株、自然弱毒株等。与2018年传入的非洲猪瘟毒株相比，该类毒株的基因组序列、致病力等发生明显变化。生猪感染该类毒株后，潜伏期延长，临床表现轻微，后期可出现关节肿胀、皮肤出血型坏死灶，感染母猪产仔性能下降、死淘率增高，出现流产死胎/木乃伊胎等。与传统的流行毒株相比，生猪感染非洲猪瘟变异毒株后排毒滴度低、间隙性排毒，难以早期发现。

因此，对可疑猪群、人员、环境等进行非洲猪瘟病毒，特别是变异株病原的检测尤为重要，是猪场防控非洲猪瘟的重点。

但是，在猪场实际检测采样时，猪场地面、墙面、栏舍、物品、人员和环境等场景中，可疑待测病原浓度低，采样样本容量大。这些实际问题导致病原核酸检出率低、检测量增大、检测成本增加。

那么，在进行非洲猪瘟变异毒株的监测工作时，我们该如何解决这些问题呢？

2021年3月22日，我国农业农村部发布《养猪场非洲猪瘟变异株监测技术指南》，指导养猪场对猪群、人员、环境等进行科学排查，防控变异毒株。该指南指出：与传统毒株相比，生猪感染变异毒株后排毒滴度低、间隙性排毒，难以早期发现，应该加强监测。此外，由于环境样本病原浓度低，核酸检出率低等原因，指南推荐：混样检测时，混样数量不超过5个。

混检确实大大减少了检测工作量，降低养殖场检测成本，但是，针对本身病原浓度较低的待测样本，传统的200ul核酸提取上样量，混样检测时会降低病原检出率。而采用1000ul核酸提取上样量时，经过大量实验验证，病原检出率不会降低。