蛋白质组学样品寄样要求，掌握这几个知识点终生适用！

“我要送的样品比较特殊，但是想要做蛋白组学，怎么处理可以进行抽提实验？”“做LC-MSMS蛋白鉴定，磁珠样本寄样需不需要干冰保证低温环境？”想必各位伙伴们都在工作、实验中遇到过这样的问题，现在就让实验室里专业的前处理人员来帮我们回答这些问题吧~

首先，寄样需不需要提供冷冻环境，答案是肯定的，蛋白质组学的样本在低温的环境中不易变性，在抽提实验中蛋白的得率就会更高，所以小伙伴们蛋白寄样基本都是需要加上干冰的哦。一般加干冰的量我们按照每天5kg来进行递增计算，本地送样推荐10kg，偏远地区需要20kg。

接下来我们来了解一下针对不同类型样本的送样指南，包教包会哦！

动物组织的样本蛋白量相对较高，送样量的要求也相对比较宽松，一般提供50~100mg的量即可。此外，组织上有血迹、脂肪、结缔组织的还需要用PBS和组织剪将其清理干净。送样前将样品用液氮速冻5min，放置在-80℃保存，送样时需要置于干冰环境中运输。

植物相较于动物，蛋白占比不高，所以送样在量上面的要求会多一些，推荐送500mg以上的量可以确保实验能够提取到充足的蛋白。如果是种仁、豆类等蛋白含量比较高的，200mg足以完成抽提。

处理样本需要用PBS将样本表面的泥土等杂质冲洗干净，去除掉多余的组织。最好能够保证样本的形态和纯度，不推荐用锡纸包裹，放在EP管中使其形态完整为最佳。用液氮急速冷冻5min后置于-80℃环境中保存，送样时需要添加干冰。

微生物比较常规的类型包括细菌和真菌。一般来说1×10⁸个或200mg的样本量可以保证实验顺利进行。

液体样本一般有血清血浆、细胞上清、发酵液、脑脊液等，具体的处理方式这里直接上图给伙伴们参考。

微量样本(1mg左右)一般是会作为PCT样品进行寄送，除石蜡切片不需要干冰寄样外，其余组织等样品还是需要干冰提供送样低温环境。在数量上的要求一般细胞需要50-100万个细胞以上，穿刺样本等组织需要1-2mg，石蜡切片则需10 µm的石蜡切片10片/样（≥1 mg）。

LC-MSMS主要功能是蛋白鉴定，目前我们接收的样本有SDS-PAGE胶条和蛋白磁珠样本。

SDS-PAGE胶条建议大家使用考马斯亮蓝染色（条带清晰，无降解），用EP管装好，不用加任何保存液，用冰袋寄送即可，颜色非常浅的条带可取多个重复样本放一起。胶条只需要常温保存，运输需要放在冰袋环境中即可。

蛋白磁珠样本不建议加loading buffer后100度加热，直接将连着磁珠的蛋白溶液用干冰寄送就好。送样形式也是采用-80 度冻存，干冰运输。

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家橙老师 撰文

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