毛发中常见毒品及代谢物的监测

2020-12-12 07:44:04 沃特世科技（上海）有限公司

背景

近年来，在毒物分析中，尤其在法医毒物学分析领域，毛发基质的分析检测越来越受关注并扮演着非常重要的角色。毒品一经吸食，会相应地在血液、尿液等生物基质中留下痕迹，成为认定吸毒违法行为的证据。然而，不同基质分析具有不同的吸毒追溯期，一旦超过期限，血液、尿液中便检测不到毒品成分。而毛发不同，人体毛发的主要成分是角质蛋白，约占97%。人吸毒后，毒品进入人体后会随着血液循环进入毛囊，毒品原型及其代谢物会被毛发中的角质蛋白固定，并稳定地保留在毛发中。

众所周知，头发是人体毛发中生长最快的一种，每月平均生长约1 cm，而毒品及代谢物会随着头发的生长而迁移，所以可以通过分析检测发根到发梢不同段的头发，去反推被检测人员的吸毒史。并且毛发基质与传统的血浆、尿液等生物基质相比，具有采集方便、化学性质稳定、容易保存运输等特性，更有利于检验人员得到准确的检验结果。

本文基于ACQUITY UPLC I-Class - Xevo TQD超高效液相色谱质谱联用系统，应用ACQUITY UPLC HSS PFP色谱柱，参考《司法鉴定技术规范》毛发中15种毒品及代谢物的液相色谱-串联质谱检测方法，开发了一种可靠的用于毛发中常见的11种毒品及代谢物（06-单乙酰吗啡、吗啡、可待因、甲基苯丙胺(MAMP)、苯丙胺(AMP)、3,4-亚甲双氧甲基苯丙胺(MDMA)、3,4-亚甲双氧苯丙胺(MDA)、3, 4-亚甲双氧乙基苯丙胺(MDEA)、可卡因、苯甲酰爱康宁、氯胺酮、去甲氯胺酮、δ-9-四氢大麻酚）的UPLC-MS/MS分析方法，可用于毛发中毒物的检出分析。

实验

实验仪器

图1.ACQUITY UPLC I-Class + Xevo TQD超高效液相色谱质谱联用系统

实验条件

▐ LC系统条件

色谱柱：Waters ACQUITY UPLC HSS PFP（1.8 μm、 2.1×100 mm）色谱柱
（P/N:186005967）
柱温：25 ℃
流动相A：水- 含有10 mM甲酸铵、0.1%甲酸
流动相B：乙腈/水=9/1含有10 mM 甲酸铵、0.1%甲酸
流速：0.4 mL/min

▐ MS系统条件

离子模式: 正离子模式（ESI+）
数据采集模式：多反应监测（MRM）
毛细管电压: 0.5 kV
脱溶剂气温度：550 ℃
脱溶剂流量：1,000 L/Hr

▐ 数据处理软件

MassLynx和TargetLynx

▐ 样本制备

毛发样本依次用适量的水和丙酮震荡洗涤两次，晾干后剪成约1 mm段，置冷冻研磨仪中粉碎，呈粉末状。

称取毛发粉末20 mg，加入1.0 mL内标甲氧那明标准工作液（甲氧那明1 ng/mL），冰浴超声30 min，离心，移取上清液，于60 ℃水浴空气流下吹干。残留物用100 μL甲醇复溶，供仪器分析。

实验结果

▐ 试验结果汇总，见表2：

图片1.png

图2. 试验结果汇总

▐ 实验详细结果

毛发基质加标样本连续进样6针，6针峰面积比的%RSD均在5.3以内，见下图

图3.毛发基质加标样本重现性

标准品和毛发基质添加的谱图：

11种毒品及其代谢物在纯溶液中（10 ng/mL）与毛发基质加标(LOD)样本的色谱图见下图：

图4.左图标准品的谱图；右图毛发基质加标样本的谱图

计算纯溶液标准物质的保留时间与毛发基质加标样本中相应标准物质的色谱峰的保留时间的相对误差，相对误差均在±0.79%内，结果见下表：

图5.标准物质的保留时间与样品中相应标准物质的色谱峰的保留时间的相对误差

进样前后空白溶剂无干扰，见下图：

图6.左图为进样前空白溶剂谱图；右图为进样后空白溶剂谱图

结论

本实验中，采用Waters ACQUITY UPLC I-Class配Xevo TQD的超高效液相色谱质谱联用系统，选用ACQUITY UPLC HSS PFP超高效色谱柱，对毛发基质加标（LOD）样本中常见的11种毒品及其代谢物均可检出。基质添加样本连续进样6针，测得6针峰面积的%RSD均在5.3以内，采用保留时间和离子丰度比进行定性分析，标准物质的保留时间与毛发基质加标样本中相应标准物质的色谱峰的保留时间的相对误差，相对误差均在±0.79%内，且空白溶剂无干扰，其结果符合司法鉴定技术规范要求标准，可用于毛发毒品及其代谢物的检出分析。