2020-12-10 19:37:20 海能未来技术集团股份有限公司
说到灵芝,就会不由自主的想到电视剧里白娘子救活许仙的“千年灵芝”……
中国人的灵芝情节自古有之。《黄庭经》云:
灵芝,瑞草也。
生三秀山中,
仙家名为三秀草。
久食轻身不老,
益智健脑。
灵芝虽好,但现代科学已经表明,灵芝其实就是一种真菌的子实体类。由灵芝制成的灵芝粉,现在已是一种常见的保健品。
灵芝中最有效的成分之一就是灵芝多糖,它有着多方面的药理活性:能提高机体免疫力、加速血液微循环、提高血液供氧能力、降低机体静止状态下的无效耗氧量等。今天的实验,就是测定灵芝粉中的多糖含量。
索氏提取仪测定灵芝粉中多糖含量
实验仪器及试剂
索氏提取仪 SOX406;紫外可见光-分光光度计i8;分析天平;离心机;干燥器;容量瓶50ml/10ml若干。
实验用水应符合GB/T6682中三级用水的规格,使用试剂除特殊说明外,均为分析纯。
硫酸;苯酚;乙醇;葡萄糖;滤纸;脱脂棉。
实验步骤
1.仪器准备:请参照说明书,清洗溶剂杯。
2.取样:将样品进行粉碎,精确称取样品约2.0g左右(记为m),并用双层滤纸包包好,放入滤纸筒内。
3.第一阶段提取:加入抽提溶剂水60mL,打开冷凝水,启动脂肪测定仪406。设置第一阶段萃取时间2h;萃取温度140℃;实验结束完,将萃取液收集到烧杯内,并用少量蒸馏水由上端萃取口分多次淋洗样品,并入到烧杯内,溶剂杯内换入新的蒸馏水再次进行萃取。再重复此操作两次。
4.浓缩:将烧杯置于带有石棉网的电炉上烘干至少量水时,在进行水浴烘干。
5.醇沉淀:将残渣用5ml水溶解,边搅拌边缓慢地加乙醇75ml,摇匀,在低温环境下静置12小时,离心,弃去上层清液,沉淀物用热水溶解并转移至50ml容量瓶中,放冷,加水至刻度,摇匀。
6.苯酚溶液配制:称取10.0g苯酚置于200ml容量瓶中,加水定容,置于棕色瓶中,避光保存。
7.葡萄糖溶液配制:称取葡萄糖0.1g溶于100ml容量瓶中,并定容。取其中10ml溶液于100ml容量瓶中,并定容,摇匀得0.1mg/ml溶液。
8.标准曲线建立:取5个10ml容量瓶,向其中加入0.0,0.2,0.4,0.6,0.8ml葡萄糖溶液,依次加水1ml,苯酚1ml,浓硫酸5ml,振摇5min,置于40℃水浴15min,放冷定容至10ml,用紫外-可见分光光度法在490nm波长处测定其吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
9.样品测试:取样品0.5ml,按9中步骤进行依次加入各种试剂,进行测定。从标准曲线上,读出其浓度C(μg/ml)。
计算结果
根据药典规定,灵芝以无水葡萄糖计,可根据如下公式进行计算,增重法计算提取物含量:
提取物含量(%) =
结果分析
标准曲线 C=-1.556+119.1×A
样品编号
样品质量m/g
浓度c(μg/ml)
吸光度Abs
多糖含量/%
样品1
2.0005
181.25
1.561
0.906
样品2
2.0020
181.85
1.565
0.908
注意事项
1.该实验每阶段收集时,建议多次淋洗。
2.在萃取过程中,将样品浸入到萃取液中,可加速萃取速度。
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