凯氏定氮法测定乳清蛋白中蛋白质含量

乳清蛋白质粉是采用先进工艺从牛奶分离提取出来的珍贵蛋白质，以其纯度高、吸收率高、氨基酸组成最合理等诸多优势被推为“蛋白之王”。能够为人体提供必需的蛋白质营养；维持皮肤和组织器官的正常；避免一些摄入动物蛋白引起的危害。

《GB 11674—2010乳清粉和乳清蛋白粉》中明确规定了乳清蛋白粉中蛋白质的含量不低于25%，下面则为大家介绍一下乳清蛋白中粗蛋白含量测定的方法。

凯氏定氮法测定乳清蛋白中蛋白质含量

乳清蛋白中的有机态氮在浓硫酸和催化剂的共同作用下，转化为氨态氮。加碱蒸馏后，用硼酸吸收后，再以硫酸标准滴定液进行滴定。

仪器：

K1100F全自动凯氏定氮仪；SH420F石墨消解仪

试剂与器具：

硫酸 分析纯，c(HCL)=0.1mol/L，标准滴定液。

硼酸 分析纯，质量分数2%。

氢氧化钠 分析纯，质量分数40%。

溴甲酚绿-甲基红混合指示剂  将溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L)与甲基红乙醇溶液(1g/L)按5：1体积比临时混合摇匀备用。

催化剂片 3g硫酸钾和0.2g硫酸铜混合均匀压片

无屑称量纸

10mL移液管

K1100F全自动凯氏定氮仪

SH420F石墨消解仪

1.取样：取0.2g左右的样品，用无屑称量纸包住投入消化管中，加催化剂一片（或硫酸钾3g与硫酸铜0.2g)，再沿瓶壁滴加硫酸8.0ml。

2.消解：利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消化过程采用直线线升温模式，在420℃消解1h后取下放凉。

3. 待消化管内溶液冷却至室温后，将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下：

稀释水：30ml

硼酸： 25ml

碱：  30ml

蒸馏时间：5min

4.仪器自动滴定并给出计算结果。  

氮含量

蛋白质含量  

式中：

M——标准酸摩尔浓度（mol/L)

W——样品质量（g）

V0——空白样滴定标准酸消耗量（mL）

V——样品滴定标准酸消耗量（mL），精确到小数点后四位

6.25——蛋白质系数

其实验结果符合国标要求。