分析仪器如何校正？

检定规程

检定规程按液相色谱检定规程《JJG705-2014》进行。检定内容包括，基线噪音与基线漂移、定性重复性与定量重复性、泵流量的设定值误差与稳定性、梯度误差、柱箱温度设定值误差与柱箱温度稳定性、检测器性能等。那么校准做哪些内容呢？我们以AGILENT 1260HPLC为例来说明。

校准内容

1、 VWD紫外可见光检测器

1.1基线噪音与基线漂移

选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，紫外检测器的波长设定为254nm，检测灵敏度调到最灵敏档。开机预热，待仪器稳定后记录基线30min，选取基线中噪声最大峰-峰高对应的信号值，按公式计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示，基线漂移用30min内基线集市起始点最大信号值（AU/30min）表示。

 图：软件上计算的基线噪音与基线漂移。

1.2最小检测浓度

图：萘-甲醇1.00╳10-7 g/mL的色谱图

1.3、定性定量重复性

将仪器各部分联接好，选用C18色谱柱，用100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，紫外可见光检测器设定为254nm，灵敏度选择适中，基线稳定后由进样系统注入一定体积的1.0×10-4g/mL萘-甲醇溶液标准物质；连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，按公式（9）计算相对标准偏差RSD6。

图：标准物质连续6次的图谱与RSD值。

2、 FLD荧光检测器

2.1基线噪音与基线漂移

选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，检测灵敏度调到最灵敏档，激发波长设定为290nm，发射波长设定为330nm，仪器预热稳定后，记录基线30min，选取基线中噪声最大峰-峰高对应的信号值，按公式（7）计算基线噪声，用检测器自身的物理量（FU）做单位表示，基线漂移用30min内基线偏离起始点最大信号值（FU/30min）表示。

2.2最小检测浓度

2.3、定性定量重复性

将仪器各部分联接好，选用C18色谱柱，用100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，紫激发波长设定为290nm，发射波长设定为330nm，灵敏度选在中间档，基线稳定后由注入一定体积的1╳10-5g/mL萘-甲醇标准溶液；连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，按公式（9）计算相对标准偏差RSD6。

2.3、定性定量重复性

将仪器各部分联接好，选用C18色谱柱，用100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，紫激发波长设定为290nm，发射波长设定为330nm，灵敏度选在中间档，基线稳定后由注入一定体积的1╳10-5g/mL萘-甲醇标准溶液；连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，按公式（9）计算相对标准偏差RSD6。

总结：

从上述校准过程可以看出，校准与检定有一定区别，百度上说，检定过程必须严格执行国家计量技术规范，带有强制性；检定结果要给出计量器具是否合格、能否投入使用的结论。而校准过程，用户可根据需要自主选择校准项目、校准单位和校准时间间隔。

校准后只需给出初校准计量器具的示值与标准值之间的关系及可信度，不需要做出计量器具是否合格的结论。用户可自己选择计量器具能否投入使用。因此，计量校准比计量检定更灵活、应用也更广泛。

我们也以AGILENT GC为例，7890 6890

1.校正项目和技术要求

1.1热导池(TCD) 检测器

1.2基线噪声≤0.1mV ；基线漂移(30min)≤0.2 mV

1.3TCD灵敏度STCD≥800Mv0ml/mg

1.4火焰离子化（FID）检测器

1.5FID检测限≤5×10-10g/s

1.6FID基线噪声≤1×10-12A；基线漂移（30min）≤1×10-11A

1.7仪器的定量重复性 RSD≤3%

2.校正条件

2.110μl微量进样器

2.2色谱级的标准物质

2.3苯-甲苯溶液

2.4正十六烷-异辛烷溶液

3.校正方法

3.1热导池(TCD) 为检测器

3.1.1校正条件

3.1.1.1色谱柱：TDX-01（或性能相似的载体） 内径2-3mm,长1-2m的不锈钢柱

3.1.1.2载气：氦气(纯度不低于99.99%),流速30-60ml/min

3.1.1.3温度：柱箱70℃左右,检测室100℃,汽化室120℃

3.1.1.4桥流或热丝温度：选择最佳值

3.1.2TCD基线噪声和基线漂移测定

3.1.2.1按3.1.1条件,将衰减置于最灵敏档,用零位调节器调节,使输出信号在记录器或积分仪的中间位置,加桥电流待基线稳定后,记录基线半小时,测量并计算基线噪声和基线漂移。

3.1.2.2Agilent7890色谱仪的基线噪声和漂移使用工作站软件直接计算并打印出来。在OFFLINE中依次点击Report→System Suitability→Edit Noise Ranges,再输入计算基线噪声和漂移的时间范围,查看报告时选择Performance报告形式。

3.1.2.3可接受标准：基线噪声≤0.1mV 基线漂移（30min）≤0.2mV

3.1.3TCD灵敏度AFC测定

3.1.3.1在6.1.1条件下，待基线稳定后，注入2μl浓度为5mg/ml的苯-甲苯溶液，连续进样6次，记录苯峰面积。

STCD：TCD灵敏度（Mv。ml/mg）；A：苯峰面积算术平均值；W——苯进样量（mg）；Fc——校正后的载气流速（ml/min）

3.1.3.2可接受标准：STCD≥800mv.ml/mg

3.2火焰离子化（FID）检测器

3.2.1校正条件

3.2.1.1色谱柱用DB-5型或HP-5型，内径为0.25～0.32mm，膜厚为0.25～0.32μm，长为30～50m

3.2.1.2载气：氦气（纯度≥99.99%），流速1—2ml/min；氢气（纯度≥99.99%），流速50ml/min；空气，不得含有影响仪器正常工作的灰尘、水分及腐蚀性物质，流速450ml/min

3.2.1.3分流为1：50

3.2.1.4温度：柱箱150℃左右，检测室300℃，气化室260℃

3.2.1.5量程：选择最佳值

3.2.1.6液体标准物质：浓度为100ng/μl正十六烷-异辛烷溶液

3.2.2FID基线噪声和基线漂移校正测定

3.2.2.1按6.2.1的校正条件,点火并待基线稳定后,记录半小时,测定并计算基线噪声和基线漂移

3.2.2.2Agilent6890色谱仪的基线噪声和漂移计算同3.1.2

3.2.2.3可接受标准：基线噪声≤1×10-12A 基线漂移（30min）≤1×10-11A

3.2.3FID检测限测定

3.2.3.1在2.2.1的校正条件下,使仪器处于最佳运行状态.待基线稳定后,用微量注射器注入2μl浓度为100ng/μl的正十六烷-异辛烷溶液,连续进样6次,计算正十六烷峰面积的算术平均值.根据以下公式计算检测限:

3.2.3.2DFID=2NW/A DFID：FID检测限( g/s)；N：基线噪声（A）；W：正十六烷的进样量（g）正十六烷的峰面积(A.S)

3.2.3.3可接受标准：检测限≤5×10-10g/s

3.3定量重复性测定

3.3.1定量重复性以所用检测器条件、将所测组份峰面积以相对标准差RSD表示.

3.3.2按下公式计算相对标准偏差:

n 1

RSD = [∑（Ai- A ）2]/（n-1） × ×100%

I=1 A

RSD：相对标准偏差（%）；n：测量次数；Ai：第i次测量的峰面积

A ：n次进样的峰面积算术平均值；I：进样序号；可接受标准：RSD≤3%

4.性能确认

4.1使用标准品或供试品，确认仪器性能符合使用要求；

4.2先进行色谱柱的性能确认，内容包括：分离度，对称因子，理论塔板数和峰面积标准偏差。

4.3气相色谱柱的确认

4.3.1测试标准样：己二醇、对氯苯酚、壬酸甲酯、4-丙基苯胺、正十三烷、十一烷醇、十五烷的250ppm CH2Cl2溶液。

4.3.2仪器条件：气化室温度为260℃，检测器温度为320℃，恒流速为1.0ml/min,柱恒温为130℃，进样量为：1ul,运行15min.，分流1：50。

4.3.3色谱柱：HP-1 30m×0.25mm×0.25um ；HP-5 30m×0.32mm×0.25um；TDX-01内径2-3mm,长1-2m的不锈钢柱。

4.3.4评价标准：连续进行5次分析, 分离度R＞1.5；十五烷对称因子S在0.80~1.50范围内；十五烷柱效＞3000m-1；十五烷峰面积的标准偏差≤3.0%。

4.4按照性能确认方法逐步进行，并记录谱图；根据性能测试的结果，评价仪器是否符合性能要求。

5.校正结果处理和校正周期

5.1校正结果全部项目均符合技术要求者，可继续使用。若出现某些项目达不到规格要求，关于仪器情况，仪器负责人以维修报告的形式报于QC经理，由QC经理批准维修方案。

5.2 校正周期为1年 。