生物探索 | 当蛋白遇见色谱分离科学（三）- 蛋白反相分离技术

在抗体药物定性过程中，高分辨质谱用于分析完整质量数，亚基分析则作为肽图检测的一个补充，这些技术手段可以从多个层面展示抗体结构和组成上的差异变化。然而在完整蛋白与亚基分析过程中，会面临两个挑战性的实验难题：

• 糟糕的峰形

• 残留较严重

在反相分离技术下，可添加异丙醇IPA破坏保持蛋白折叠的疏水作用，也可通过高温70-90℃进行变性的完整抗体分析，蛋白质展开和变性时可获得更理想的峰形，这就要求色谱柱可以耐受高温；而对于严重的残留问题，除在试验过程通过空白进样重复洗脱进行改善，色谱柱本身设计也是帮助改善残留的重要环节。

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